Podešavanje sistema optičkih putanja slike svetlosnog mikroskopa i obrisa mikroskopskog pregleda
Podešavanje sistema optičke putanje slike i okvira mikroskopskog pregleda
Podešavanje slikovnog optičkog sistema mikroskopa vrši se prema potrebama različitih mikroskopskih tehnika. Takozvana mikroskopija, ukratko, je metoda osvjetljenja koja se koristi pri posmatranju uzorka kroz mikroskop, te tehnika i metoda dobivanja boljeg kontrasta na slici koju formira uzorak. U nastavku se ukratko opisuje mikroskopija koja je sazrela u nekoliko metoda i odgovarajuća metoda podešavanja optičkog sistema za snimanje mikroskopom.
1. Svijetlo polje prijenosa:
Ovo je najtradicionalnija i najčešća metoda primjene od izuma mikroskopa. Osnovne komponente: a. Objektivno sočivo: bilo koje objektivno sočivo može se koristiti za posmatranje svijetlog polja; b. Niski: mogu se koristiti sve vrste nišana, po mogućnosti opremljeni otvorom dijafragme. Metoda podešavanja: Nakon što se podesi Kuhlerov sistem osvjetljenja gore navedenog mikroskopa, može se primijeniti metoda svijetlog polja. Opseg primjene: svi obojeni dijelovi tkiva, razmazi krvi, itd. Mjere opreza: a. Kada se koristi metoda posmatranja svijetlog polja, Kuhlerov sistem osvjetljenja mora biti podešen; b. Dijafragma vidnog polja ne bi trebalo da se otvara proizvoljno, a prednja leća kondenzatorskog ogledala treba da bude faktički postavljena van i u optičku putanju kada se koriste objektivi od 10×, manje od 10× i više od 10 ×; c. Dijafragma blende kondenzatorskog ogledala ne bi se trebala koristiti za podešavanje svjetline vidnog polja, a visina kondenzatorskog ogledala ne bi se trebala podešavati nasumično, jer će se u suprotnom rezolucija mikroskopa smanjiti i rezolucija obojenog tkiva će biti oštećena. rezolucija mikroskopa i oštećenja prilagođena je Kuhlerovom sistemu osvjetljenja; d. za mikrofotografije, svaku promjenu u korištenju uvećanja objektiva, morate podesiti dijafragmu blende kondenzatorske leće, tako da njena veličina bude točno jednaka numeričkom otvoru koji se koristi u objektivu objektiva od 2/3.
2. Metoda transmitiranog svjetlosnog faznog kontrasta:
Ovo je savremeni mikroskopski pregled metode kontrastnog poboljšanja. Osnovne komponente: sočivo objektiva s faznim kontrastom, svijetlo vidno polje i fazno kontrastni višenamjenski optički nišan, teleskop za fokusiranje, zeleni filteri.
Metode podešavanja:
a. Na osnovu podešavanja Kuhlerovog sistema osvjetljenja, jasno fokusirajte uzorak koristeći metodu svijetlog polja
b. Okrenite optički nišan na Ph1 da biste poravnali položaj skale brojčanika, odaberite sočivo objektiva s faznim kontrastom 10 × i zamijenite prozirni uzorak koji želite promatrati.
c. Isključite jedan od okulara, zamijenite ga centriranim teleskopom i fokusirajte se na dva fazno kontrastna prstena u vidnom polju (crni fazni kontrastni prsten na objektivu i fazni kontrastni prsten za prijenos svjetlosti na kondenzatorskom sočivu).
d. Dva prstena faznog kontrasta u vidnom polju se ne moraju nužno podudarati, podesite dva uređaja za podešavanje na niskopu (podešavanje lijevog i desnog položaja poluge za podešavanje faznog kontrastnog prstena i podešavanje prednjeg i stražnjeg položaja dugmeta za trenje) , tako da se prsten za prijenos svjetlosti za prednju i stražnju stranu desno i lijevo poklopi sa crnim prstenom
e. Nakon podešavanja, vratite se na okular za posmatranje i pritisnite zeleni filter u optičku putanju da biste posmatrali sliku faznog kontrasta uzorka.
f. Kada postoje objektivi od 20× i 40× za posmatranje, sočivo za uočavanje treba postaviti na poziciju Ph2, a kada se koristi 100 objektiva, sočivo za uočavanje treba postaviti na poziciju Ph3.
Opseg primjene: Pogodan je za posmatranje prozirnih, neobojenih ili neobojljivih uzoraka, kao što su sve vrste ćelija, živa tkiva, neobojeni ili neobojeni dijelovi tkiva, vodeni organizmi i tako dalje.
3. Metoda faznog kontrasta diferencijalne interferencije:
Da bi se prevazišao fazni kontrast metoda posmatranja detalja uzorka oko slike praćene aureolom, maskiraće detalje koji su trebali da se vide, kao i uzorci ili delovi tkiva zahtevaju prilično tanku debljinu, u principu mogu biti deblji od 10 µm i druga ograničenja, korištenje principa smetnje dvostrukog snopa za dizajniranje subdiferencijalne metode faznog kontrasta interferencije.
Metode podešavanja:
a. DIC metoda se mora prilagoditi na osnovu toga da je Kulemin sistem već prilagođen
b. Koristeći 10× objektiv objektiva, odredite položaj fokusa sočiva objektiva koji može jasno vidjeti uzorak sa svijetlim vidnim poljem.
c. Postavite polarizator u putanju osvjetljenja, uz napomenu da treba biti orijentiran u smjeru istok-zapad.
d. Okrenite točkić kondenzatora u položaj koji odgovara upotrebi objektiva 10 ×, tj. DIC 0.3-0.4.
e. Umetnite DIC klizač za 10× objektiv objektiva na stražnjoj strani objektiva ili na pretvarač objektiva.
f. Umetnite analizator u optičku stazu za snimanje i imajte na umu da njegova orijentacija treba biti jug-sjever.
g. Zamijenite prozirni uzorak koji želite promatrati, uključite izvor svjetlosti da jasno fokusirate uzorak.
h. Podesite DIC umetak tako da slika kontrasta diferencijalne interferencije postigne najbolji efekat, odnosno najočitiji efekat reljefa.
i. Istovremeno, podesite dijafragmu blende kondenzatorskog ogledala, tako da efekat kontrasta takođe bude optimalan.
j. Zatim fino podesite detalje uzorka da vidite strukturu uzorka na različitim nivoima.
k. Ako se umetne komplementarna boja (crvena retardirajuća ploča prvog reda) i istovremeno se podesi DIC umetak, u vidnom polju se mogu vidjeti neprestano mijenjajuće briljantne boje, s crvenom, narandžastom, žutom, zelenom, plavom, ljubičasta, ružičasta, roze-ljubičasta i zlatno-žuta. Područje primjene: prozirni ili neodrživi dijelovi tkiva, debljine do oko 100?m, živo tkivo i žive ćelije u kulturi, mali živi organizmi i sl.
