Poređenje između konfokalne mikroskopije i konvencionalne optičke mikroskopije
Mikroskop je glavni alat za posmatranje ćelija. Prema različitim izvorima svjetlosti, može se podijeliti u dvije kategorije: optički mikroskopi i elektronski mikroskopi. Prvi koristi vidljivo svjetlo (ultraljubičasti mikroskop koristi ultraljubičasto svjetlo) kao izvor svjetlosti, dok drugi koristi snop elektrona kao izvor svjetlosti. I obični optički mikroskopi i laserski konfokalni mikroskopi spadaju u optičke mikroskope.
Običan optički mikroskop
Uobičajeni biološki mikroskop sastoji se od tri dijela, i to: ① sistema rasvjete, uključujući izvor svjetlosti i kondenzator; ② Sistem optičkog pojačanja, koji se sastoji od objektiva i okulara, je glavno tijelo mikroskopa. Kako bi se eliminisala sferna i hromatska aberacija, i okular i objektiv su sastavljeni od složenih grupa sočiva Mehanički uređaj koji se koristi za fiksiranje materijala i olakšavanje posmatranja.
Jasnoća slike mikroskopa ne zavisi samo od njegovog uvećanja, već i od njegove rezolucije. Rezolucija se odnosi na sposobnost mikroskopa (ili ljudskog oka na udaljenosti od 25 cm od mete) da razlikuje objekte u malim intervalima. Veličina rezolucije zavisi od talasne dužine svetlosti, indeksa otvora blende i indeksa prelamanja medija. Izražava se kao: R=0.61 λ/NANA=nsin /2, gdje je n=indeks prelamanja medija; =ugao otvora blende (ugao pod kojim uzorak otvara otvor sočiva objektiva), NA=numerički otvor blende. Da li je ugao ogledala uvek manji od 180?, Dakle, maksimalna vrednost zui za sina/2 mora biti manja od 1.
Indeks prelamanja stakla koji se koristi u proizvodnji optičkih sočiva je 1.65-1.78, a što je indeks prelamanja medija koji se koristi bliži indeksu prelamanja stakla, to bolje. Za suva sočiva objektiva, medij je zrak, a omjer otvora blende je općenito 0.05-0.95; Uljno sočivo koristi kedrovo ulje kao medij, a omjer otvora blende može biti blizu 1,5.
Talasna dužina obične svjetlosti je {{0}} nm, tako da vrijednost rezolucije mikroskopa neće biti manja od 0.2 μm, a rezolucija ljudskog oka je 0,2 mm. Stoga je maksimalno povećanje za dizajn mikroskopa obično 1000X.
