Osnovni rad fluorescentnog mikroskopa
a. Ugasite svjetla u prostoriji i upalite živinu lampu mikroskopa;
b. Odaberite odgovarajući filter prema fluoresceinu označenom uzorkom;
c. Postavite uzorak i pronađite odgovarajuće vidno polje;
d. Ako trebate da slikate, molimo vas da potvrdite da je film u boji ugrađen u kameru;
e. Uključite Selfie uređaj, odaberite ručnu brzinu, obično je brzina snimanja unutar 0.5-10 sekundi;
f. Nakon upotrebe isključite svu struju i zabilježite korištenje. the
the
3. Metoda snimanja fluorescentne slike
Fluorescentna slika koju vidi fluorescentni mikroskop ima i morfološke karakteristike i fluorescentnu boju i sjaj. Kada se ocjenjuju rezultati, to dvoje se mora kombinirati za sveobuhvatnu prosudbu. Rezultati se bilježe na osnovu subjektivnih pokazatelja, odnosno vizuelnog posmatranja radnika. Kao opće kvalitativno zapažanje, u osnovi pouzdano. Sa razvojem tehnologije i nauke, objektivni indikatori se koriste za bilježenje rezultata prosuđivanja u različitom stepenu, kao što su ćelijski spektrofotometri, analizatori slike i drugi instrumenti. Međutim, rezultati zabilježeni ovim instrumentima također se moraju kombinovati sa subjektivnim prosudbama. the
Fotografija fluorescentnog mikroskopa je veoma neophodna za snimanje fluorescentnih slika. Budući da je fluorescencija lako izblijediti i oslabiti, potrebno je snimiti rezultate u realnom vremenu. Metoda je u osnovi ista kao kod obične fotomikrografije. Samo treba koristiti fotoosjetljivi film velike brzine. Budući da ultraljubičasto svjetlo ima snažan učinak na gašenje fluorescencije, kao što su FITC markeri, svjetlina fluorescencije će se smanjiti za 50 posto kada se zrači ultraljubičastim svjetlom u trajanju od 30 sekundi. Stoga, ako je brzina ekspozicije preslaba, fluorescentna slika se ne može snimiti. Fluorescencijski mikroskopi za opšta istraživanja imaju poluautomatske ili potpuno automatske uređaje za fotomikrografiju. the
the
4. Mjere opreza za korištenje fluorescentne mikroskopije
a. Radite striktno u skladu sa zahtjevima fabričkih uputa za fluorescentni mikroskop i ne mijenjajte program po volji. the
b. Pregled treba obaviti u mračnoj prostoriji. Nakon što uđete u mračnu prostoriju, priključite napajanje i upalite živinu lampu ultra visokog pritiska na 5-15 minuta. Nakon što je jaka svjetlost iz izvora svjetlosti stabilna, oči se potpuno prilagođavaju mračnoj prostoriji, a zatim počinju promatrati uzorak. the
c. Kako biste spriječili oštećenje očiju od ultraljubičastih zraka, nosite zaštitne naočale prilikom podešavanja izvora svjetlosti. the
d. Vrijeme inspekcije je poželjno 1-2 sati svaki put. Ako prijeđe 90 minuta, intenzitet svjetlosti živine lampe ultra visokog pritiska će se postepeno smanjivati i fluorescencija će oslabiti; nakon što se uzorak ozrači ultraljubičastim svjetlom u trajanju od 3-5 minuta, fluorescencija će također biti značajno oslabljena; stoga, ne bi trebalo da prelazi najviše 2-3 sati. . the
e. Vijek trajanja izvora svjetlosti fluorescentnog mikroskopa je ograničen, a uzorke treba provjeravati centralno kako bi se uštedjelo vrijeme i zaštitio izvor svjetlosti. Kada je vruće vrijeme, potrebno je dodati ventilatore za odvođenje topline, a nove sijalice treba snimati od početka njihovog vremena korištenja. Kada želite da je ponovo koristite nakon što se lampa ugasi, morate sačekati da se sijalica dovoljno ohladi pre nego što je upalite. Izbjegavajte paljenje izvora svjetlosti nekoliko puta dnevno. the
f. Posmatrajte uzorak odmah nakon bojenja, jer će fluorescencija postepeno slabiti tokom vremena. Ako se uzorak čuva u polietilenskoj plastičnoj vrećici na 4 stepena, vrijeme slabljenja fluorescencije može biti odgođeno i sredstvo za montažu može se spriječiti da ispari. the
g. Standard prosuđivanja svjetline fluorescencije: općenito je podijeljen na četiri nivoa, to jest, "-" znači da se fluorescencija ne može vidjeti ili je slaba. " plus " znači da je viđena samo jasno vidljiva fluorescencija. " plus plus " znači da je vidljiva jaka fluorescencija. " plus plus plus " označava vidljivu jaku fluorescenciju.
