Kako odabrati između invertnog mikroskopa i fluorescentnog mikroskopa?
Mikroskop je važan instrument u kulturi ćelija i srodnim eksperimentima sa derivatima. Trenutno na tržištu postoje različite vrste mikroskopa, a izbor mikroskopa koji odgovara potrebama i odgovara je izazov. U nastavku ćemo predstaviti principe invertiranih mikroskopa i fluorescentnih mikroskopa za svakoga od kojih će izabrati.
Obrnuti mikroskop, kao i obični mikroskop, uglavnom se sastoji od tri dijela: mehaničkog dijela, dijela za osvjetljenje i optičkog dijela. Sastav invertnog mikroskopa je isti kao i kod običnog uspravnog mikroskopa, osim što su sočivo objektiva i sistem osvjetljenja obrnuti, pri čemu je prvo ispod pozornice, a drugo iznad pozornice. Ova struktura značajno proširuje efektivnu udaljenost između rasvjetnog reflektora i bine, olakšavajući postavljanje debljih alata za posmatranje kao što su posude za kulturu i boce za ćelijske kulture (naravno, mogu se koristiti i staklene pločice), dok je radna udaljenost između objektiv objektiva i materijal ne mora biti jako velik. Invertni mikroskop koriste medicinske i zdravstvene ustanove, univerziteti i istraživački instituti za posmatranje mikroorganizama, ćelija, bakterija, kultura tkiva, suspenzija, sedimenata itd. Može kontinuirano posmatrati proces proliferacije i deobe ćelija i bakterija u medijumu za kulturu, i može obuhvatiti bilo koji oblik ovog procesa. Široko se koristi u poljima kao što su citologija, parazitologija, onkologija, imunologija, genetski inženjering, industrijska mikrobiologija i botanika.
Fluorescentna mikroskopija se koristi za proučavanje apsorpcije, transporta, distribucije i lokalizacije supstanci unutar ćelija. Za testirani objekat postoje dva načina za generisanje fluorescencije: spontana fluorescencija, koja se direktno emituje ultraljubičastim zračenjem; Sekundarna fluorescencija nastaje kada se posmatrani predmet tretira fluorescentnim bojama i izloži ultraljubičastom svjetlu prije emitiranja fluorescencije. Neke supstance u ćelijama, kao što je hlorofil, proizvode spontanu fluorescenciju nakon što su izložene ultraljubičastom zračenju; Neke tvari same po sebi možda ne emituju fluorescenciju, ali ako su obojene fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitijelima, mogu emitovati i sekundarnu fluorescenciju pod ultraljubičastim zračenjem. Fluorescentni mikroskop koristi tačkasti izvor svjetlosti visoke svjetlosne efikasnosti da emituje određenu talasnu dužinu svjetlosti (UV 365nm ili UV plavo 420nm) kroz sistem za filtriranje boja kao ekscitacijsko svjetlo, koje pobuđuje fluorescentne supstance u uzorku da emituju različite boje fluorescencije. Nakon toga se posmatra kroz uvećanje objektiva i okulara. Na ovaj način, čak i sa slabom fluorescencijom, lako je prepoznatljiv i vrlo osjetljiv pod jakim kontrastnim pozadinama. Uglavnom se koristi za proučavanje ćelijske strukture, funkcije i hemijskog sastava.
Fluorescentna mikroskopija se može podijeliti u dva tipa: transmisioni tip i padajući tip. Prvi je primitivniji, dok je drugi napredniji. Osnovna konstrukcija ova dva tipa fluorescentnih mikroskopa je slična, sa glavnom razlikom u tome što propušteno ekscitacijsko svjetlo prolazi kroz uzorak, stvarajući fluorescenciju u cjelini. Fluorescencija tada ulazi u sočivo objektiva, a što je veće povećanje, fluorescencija je slabija; Padajuća pobudna svjetlost projektuje se na površinu uzorka, proizvodeći fluorescenciju koja ulazi u sočivo objektiva. Što je veće povećanje, to je jača fluorescencija, što ga čini pogodnim za posmatranje velike snage. Glavne komponente fluorescentnog mikroskopa uključuju izvor svjetlosti živine lampe, ekscitacioni filter, spektrofotometar (tip kapljice), filtersku ploču za suzbijanje i kondenzator tamnog polja (prenosni tip). Osim toga, zbog jakog zagrijavanja živinih svjetiljki, većina njih je opremljena i filterima koji apsorbiraju toplinu. Neki fluorescentni mikroskopi također imaju fazni kontrastni objektiv i kružni otvor, što omogućava promatranje faznog kontrasta. Neki fluorescentni mikroskopi imaju obrnutu strukturu, koja je takođe obrnuti mikroskop i tako dalje.
Osim toga, gore navedeni mikroskopi mogu se sklopiti u digitalne mikroskope instaliranjem CCD-a, koji pretvara fizičke slike koje mikroskop vidi u digitalne analogne slike i slika ih na kompjuteru. Kao rezultat toga, možemo pomaknuti naše istraživanje u mikro polju sa tradicionalnog binokularnog posmatranja na reprodukciju putem displeja, čime se poboljšava radna efikasnost.
