Metoda direktnog brojanja mikrobnog mikroskopa
Eksperimentalni koraci (metoda direktnog brojanja mikroskopom)
1. Razblaživanje
Razrijedite suspenziju pivskog kvasca na odgovarajući način. Ako bakterijska otopina nije koncentrirana, nije je potrebno razrjeđivati.
2. Prostorija za mikroskopski pregled i brojanje
Prije dodavanja uzoraka, izvršite mikroskopski pregled komore za brojanje ploče za brojanje. Ako ima prljavštine, potrebno je očistiti prije brojanja.
3. Dodajte uzorke
Pokrijte čistu i suhu ploču za brojanje krvnih zrnaca pokrovnim staklom, a zatim koristite sterilnu kapaljku s finim ustima da kapnete malu kap (ne previše) razrijeđenog rastvora kvasca sa ruba poklopnog stakla. Pustite da bakterijska otopina uđe u komoru za brojanje duž otvora kapilarnom permeacijom. Općenito, komora za brojanje može se napuniti bakterijskom otopinom. Pazite da ne stvorite mjehuriće.
4. Mikroskopsko brojanje
Nakon odmora od 5 minuta, postavite ploču za brojanje krvnih zrnaca na stanicu mikroskopa, prvo koristite mikroskop male snage da locirate lokaciju sobe za brojanje, a zatim se prebacite na mikroskop velike snage za brojanje. Ako se otkrije da je bakterijska otopina pregusta ili prerijetka prije brojanja, razrjeđenje treba ponovo podesiti prije brojanja. Opšti zahtjev za razrjeđivanje uzorka je da bi trebalo biti približno 5-10 bakterijskih tijela po maloj ćeliji. Izaberite 5 ćelija iz svake sobe za brojanje (opciono 4 ugla i središnje ćelije) za brojanje. Micelij koji se nalazi na liniji mreže uglavnom se računa samo na gornjoj i desnoj liniji. Ako kvasac nikne i veličina pupoljka dostigne polovinu matične ćelije, uzimaju se dva broja bakterija. Za brojanje uzorka, sadržaj bakterija u uzorku treba izračunati na osnovu vrijednosti dobivenih iz dvije komore za brojanje.
5. Očistite ploču za brojanje krvnih zrnaca
Nakon upotrebe, isperite ploču za brojanje krvnih zrnaca sa vodenim stupcem na slavini za vodu. Nemojte koristiti tvrde predmete za pranje. Nakon pranja, osušite ga na zraku ili ga osušite fenom. Mikroskopskim pregledom se vidi da li u svakoj maloj ćeliji ima zaostalih bakterijskih tijela ili drugih taloga. Ako nije čist, mora se više puta prati dok ne bude čist.
