Upotreba stereo fluorescentnog mikroskopa i mjere opreza
Instrukcije:
(1) Postavite list materijala na pozornicu.
(2) Uključite stabilizator napona fluorescentnog mikroskopa. Zatim pritisnite startnu grupu da upalite UV lampu i nemojte je gasiti u roku od 15 minuta, i nemojte je ponovo pokretati u roku od 3 minuta nakon što se isključi.
(3) Okrenite filter ekscitacije na v, filter za razdvajanje boja na v i odaberite filter za blokiranje od 495 ili 475 nm.
(4) Odaberite uvFL40, uvFL100 fluorescentni objektivni mikroskop za mikroskopsko ispitivanje.
(5) Dodajte nefluorescentno ulje na stakalcu, prvo koristite 40 x, a zatim koristite mikroskop za fokusiranje od 100 x za provjeru. Pojavljuje se fluorescencija.
(7) Budući da fluorescencija fluorescentnih supstanci postepeno slabi s vremenom kada su ozračene ultraljubičastom svjetlošću, vidno polje treba često mijenjati tokom mikroskopskog pregleda.
(8) UvFL10 ili uvFL20 mikroskopi sa malim uvećanjem se takođe mogu koristiti za pregled materijala (ne dodaje se fluorescentno ulje kada se koriste sočiva male snage).
Metoda snimanja fluorescentne slike:
Fluorescentna slika koju vidi fluorescentni mikroskop ima i morfološke karakteristike i fluorescentnu boju i sjaj. Kada se ocjenjuju rezultati, to dvoje se mora kombinirati za sveobuhvatnu prosudbu. Rezultati se bilježe na osnovu subjektivnih pokazatelja, odnosno vizuelnog posmatranja radnika. Kao opće kvalitativno zapažanje, u osnovi pouzdano. Sa razvojem tehnologije i nauke, objektivni indikatori se koriste za snimanje rezultata prosuđivanja u različitom stepenu, kao što su ćelijski spektrofotometri, analizatori slike i drugi instrumenti. Međutim, rezultati zabilježeni ovim instrumentima također se moraju kombinovati sa subjektivnim prosudbama.
Fotografija fluorescentnog mikroskopa je veoma neophodna za snimanje fluorescentnih slika. Budući da je fluorescencija lako izblijediti i oslabiti, potrebno je snimiti rezultate u realnom vremenu. Metoda je u osnovi ista kao kod obične fotomikrografije. Samo treba koristiti fotoosjetljiv film velike brzine kao što je ASA200 ili više ili 24. iznad. Budući da ultraljubičasto svjetlo ima snažan učinak na gašenje fluorescencije, kao što su FITC markeri, svjetlina fluorescencije će se smanjiti za 50 posto kada se zrači ultraljubičastim svjetlom u trajanju od 30 sekundi. Stoga, ako je brzina ekspozicije preslaba, fluorescentna slika se ne može snimiti. Fluorescencijski mikroskopi za opšta istraživanja imaju poluautomatske ili potpuno automatske uređaje za fotomikrografiju.
Mjere predostrožnosti:
(1) Radite striktno u skladu sa zahtjevima fabričkih uputstava za fluorescentni mikroskop i ne mijenjajte program po volji.
(2) Pregled se vrši u mračnoj prostoriji. Nakon što uđete u mračnu prostoriju, priključite napajanje i upalite živinu lampu ultra visokog pritiska na 5-15 minuta. Nakon što je jaka svjetlost iz izvora svjetlosti stabilna, oči se potpuno prilagođavaju mračnoj prostoriji, a zatim počinju promatrati uzorak.
(3) Da bi se spriječilo da ultraljubičasti zraci oštete oči, treba nositi zaštitne naočale prilikom podešavanja izvora svjetlosti.
(4) Vrijeme inspekcije je poželjno 1-2 sati svaki put. Ako pređe 90 minuta, intenzitet svjetlosti živine lampe ultra visokog pritiska će se postepeno smanjivati i fluorescencija će oslabiti; nakon što se uzorak ozrači ultraljubičastim zracima u trajanju od 3-5 minuta, fluorescencija će također biti značajno oslabljena; stoga, ne bi trebalo da prelazi najviše 2-2 sati. 3h.
(5) Vijek trajanja izvora svjetlosti fluorescentnog mikroskopa je ograničen, a uzorke treba pregledati zajedno kako bi se uštedjelo vrijeme i zaštitio izvor svjetlosti. Kada je vruće vrijeme, potrebno je dodati ventilatore za odvođenje topline, a nove sijalice treba snimati od početka njihovog vremena korištenja. Kada želite da je ponovo koristite nakon što se lampa ugasi, morate sačekati da se sijalica dovoljno ohladi pre nego što je upalite. Izbjegavajte paljenje izvora svjetlosti nekoliko puta dnevno.
(6) Posmatrajte uzorak odmah nakon bojenja, jer će fluorescencija vremenom postepeno slabiti. Ako se uzorak čuva u polietilenskoj plastičnoj vrećici na 4 stepena, vrijeme slabljenja fluorescencije može biti odgođeno i sredstvo za montažu može se spriječiti da ispari.
(7) Standard prosuđivanja fluorescencije: generalno se deli na četiri nivoa, odnosno "jedan" - fluorescencija se ne vidi ili je slaba. " plus "—Može se vidjeti samo jasno vidljiva fluorescencija. " plus plus "—Vidljivo i svijetlo
