Pravilna upotreba invertne fluorescentne mikroskopije
Obrnuti fluorescentni mikroskop je multifunkcionalni mikroskop koji se koristi u polju vrhunskih bioloških naučnih istraživanja. Njegova struktura je složena i skupa. Stoga, kako bi diplomirani studenti medicine pravilno savladali rad i standarde upotrebe invertnog fluorescentnog mikroskopa, nastavnici moraju prvo naučiti osnovna znanja o invertovanom fluorescentnom mikroskopu prije nego što pokažu stvarni rad invertnog fluorescentnog mikroskopa. Oni bi trebali upoznati strukturu, princip, funkciju i osnovne metode upotrebe invertnog fluorescentnog mikroskopa, a zatim pokazati različite funkcije za različite uzorke u specifičnim operacijama upotrebe, postepeno čineći rad i upotrebu invertnog fluorescentnog mikroskopa standardiziranim za diplomirane studente medicine.
1. Ispravna upotreba vizuelnog posmatranja. Jedna od funkcija invertnog fluorescentnog mikroskopa je posmatranje u svijetlom vidnom polju. Njegov osnovni princip je postizanje snimanja u svijetloj pozadini na osnovu različite apsorpcije svjetlosti svakog dijela uzorka nakon što je obasjan svjetlošću. Uglavnom je pogodan za posmatranje obojenih ili obojenih ćelija, rezova tkiva i drugih uzoraka.
2. Ispravna upotreba diferencijalnog posmatranja. Druga funkcija invertnog fluorescentnog mikroskopa je posmatranje fazne razlike. Njegov osnovni princip je pretvaranje optičke razlike putanje različitih dijelova uzorka u amplitudnu razliku i promatranje kroz objektiv za faznu razliku s faznom pločom i reflektorom s kružnim otvorom. Uglavnom je pogodan za posmatranje živih ćelija ili neobojenih rezova tkiva. U procesu eksperimentalne nastave, osim pravilnog usmjeravanja diplomiranih studenata medicine da slijede osnovne operativne metode promatranja fazne razlike, važnije je usmjeriti ih da razumiju i savladaju uzorke primjenom promatranja fazne razlike. Za njih je metoda koja se najčešće koristi u budućim naučnim istraživanjima mikroskopsko posmatranje kultiviranih ćelija. Prvo, za odabir ćelijske opreme općenito se preporučuje korištenje posuda za kulturu, tanjura i boca od stakla i plastičnih materijala. Uglavnom su bezbojni i prozirni i mogu se direktno posmatrati pod invertovanim fluorescentnim mikroskopom bez potrebe za izlivanjem ćelijske tečnosti ili podvrgavanjem drugim tretmanima. Drugo, tokom mikroskopskog posmatranja, nemojte slučajno otvarati poklopac opreme kako biste izbjegli kontaminaciju ćelija. Konačno, operateri bi trebali nositi rukavice, maske i bijele mantile kako bi se zaštitilo ne samo svoje zdravlje već i spriječila kontaminacija stanica.
3. Ispravna upotreba posmatranja fluorescencije. Treća funkcija invertnog fluorescentnog mikroskopa je posmatranje fluorescencije. Njegov osnovni princip je korištenje ekscitacijske svjetlosti za pobuđivanje uzorka kako bi se proizvela fluorescencija, čime se postiže promatranje oblika i položaja uzorka. Uglavnom je pogodan za posmatranje uzoraka označenih fluorescencijom. Promatranje fluorescencije je važna funkcija invertne fluorescentne mikroskopije, sa skupim priborom i posebnom upotrebom. Da bi diplomirani studenti medicine pravilno savladali operativne norme posmatranja fluorescencije, nastavnici ih ne samo podučavaju osnovnim operativnim metodama, već ih, što je još važnije, uče o njihovoj jedinstvenosti. Prvo, u pripremi uzorka, površina tobogana i pokrovnog stakla treba da bude glatka i odgovarajuća debljina (klizač treba da bude između 0.8mm i 1.2mm, a pokrovno staklo treba da bude oko {{5 }}.17mm); Uzorak treba imati odgovarajuću debljinu uz izbjegavanje preklapanja ćelija ili maskiranja nečistoća; Sredstvo za zaptivanje treba koristiti jednaku mješavinu glicerola i karbonatnog pufera (0.5mol/L pH 9.0-9.5). Drugo, prije promatranja fluorescencije, svjetla u prostoriji i bijelo svjetlo invertovanog fluorescentnog mikroskopa treba isključiti kako bi se osiguralo da se nalaze u tamnoj prostoriji. Konačno, u posmatranju fluorescencije, vrijeme posmatranja treba biti strogo kontrolirano, općenito 1-2 sati po vremenu, inače će fluorescencija nestati i nestati; Prilikom podešavanja izvora svjetlosti treba nositi zaštitne naočare kako bi se izbjeglo oštećenje naočara od UV zračenja.
4. Ispravna upotreba snimanja slike. U naučnim istraživanjima ne samo da se zahteva da invertirana fluorescentna mikroskopija može postići višestruka posmatranja, već i da invertirana fluorescentna mikroskopija može postići snimanje slike. Sistem invertnog fluorescentnog mikroskopa kombinuje optički mikroskop sa računarom putem fotoelektrične konverzije, omogućavajući ne samo mikroskopsko posmatranje na okularu, već i dinamičko posmatranje slike u realnom vremenu, uređivanje i skladištenje na računaru.
