Glavni parametri objektiva optičkog mikroskopa
Glavni parametri sočiva objektiva su:
Glavni parametri objektiva uključuju uvećanje, numerički otvor blende i radnu udaljenost.
① Uvećanje se odnosi na omjer veličine slike koju vidi oko i veličine odgovarajućeg uzorka. Odnosi se na omjer dužine, a ne na omjer površine. Primjer: Faktor povećanja od 100 ×, Odnosi se na dužinu od 1 μ. Dužina uvećanog uzorka od m je 100 μm. Ako se računa po površini, uvećava se za 10000 puta.
Ukupno povećanje mikroskopa jednako je proizvodu povećanja objektiva i okulara.
② Numerički otvor blende, poznat i kao odnos otvora blende, skraćeno NA ili A, glavni je parametar objektiva i kondenzatora i direktno je proporcionalan rezoluciji mikroskopa. Numerički otvor suvog objektiva je 0.05-0.95, a numerički otvor objektiva uronjenog u ulje (kedrovo ulje) je 1,25.
optički mikroskop
③ Radna udaljenost se odnosi na udaljenost od prednjeg sočiva objektiva do pokrovnog stakla uzorka kada je uzorak koji se posmatra najjasniji. Radna udaljenost sočiva objektiva povezana je sa njegovom žižnom daljinom. Što je veća žižna daljina sočiva objektiva, to je manje povećanje i veća je njegova radna udaljenost. Primjer: Cilj 10x je označen sa 10/0.25 i 160/0.17, gdje je 10 uvećanje cilj; 0,25 je numerički otvor; 160 je dužina cijevi sočiva (u mm); 0,17 je standardna debljina pokrovnog stakla u milimetrima. Efektivna radna udaljenost 10x objektiva je 6,5 mm, a efektivna radna udaljenost objektiva 40x je 0,48 mm.
Zašto koristiti uljno ogledalo za postizanje najveće rezolucije u optičkoj mikroskopiji
Uljno ogledalo, jedan od optičkih mikroskopa, koristi se kada je sočivo uronjeno u ulje (obično kedrovo ulje) za promatranje finijih struktura. To je jedan od najčešće korištenih mikroskopa u laboratoriji, s nešto većom jasnoćom od običnih optičkih mikroskopa, a koristi se za promatranje klamidije, bakterija, organela itd.
Sočivo uljnog sočiva je vrlo malo. Kada svjetlost prolazi kroz zrak između stakla i uljnog sočiva, dolazi do prelamanja ili totalne refleksije zbog različite gustoće medija, smanjujući količinu svjetlosti koja ulazi u sočivo i zamućujući sliku. Ako se između uljnog sočiva i staklenog tobogana doda kedrovo ulje (n=1.515) s indeksom prelamanja sličnim onom stakla (n=1.52), količina svjetlosti koja ulazi u sočivo se povećava, svjetlina vidnog polja se povećava, a slika postaje svijetla i jasna
Zbog male veličine bakterija, u proučavanju morfologije bakterija, često je potrebno koristiti mikroskopsko uljno ogledalo kako bi se one jasno promatrale. Stoga je potrebno stručno ovladati načinima upotrebe i zaštite uljnih ogledala
