Koje specifikacije uzorka su potrebne za svjetlosnu mikroskopiju?
U procesu pripreme uzorka optičkog mikroskopa, debljina preseka uzorka je između 2-25um; debljina presjeka elektronskog mikroskopa je unutar 50-100nm (osim visokonaponskog elektronskog mikroskopa, čija debljina uzorka može doseći 1um), tako da korištena metoda rezanja nije ista.
U pogledu nosača, nosilac preseka optičkog mikroskopa je stakalce, dok je nosač preseka elektronskog mikroskopa mreža.
U smislu fiksacije, kriške optičkog mikroskopa fiksiraju se složenim fiksatorom, dok se kriške elektronskog mikroskopa fiksiraju više puta jednim fiksatorom.
Što se tiče bojenja, bojenje optičkih uzoraka je relativno jednostavno. Prema različitim uzorcima za posmatranje i tipovima optičkih mikroskopa, obično je dovoljno bojenje nekim fiksnim agensima za bojenje. Postoje mnoge i složene metode za ponovno bojenje uzoraka elektronskim mikroskopom, kao što su negativno bojenje, bojenje srebrom i tako dalje.
U smislu ugradnje, parafin, kolodijum, želatin, itd. se koriste kao sredstva za ugradnju rezova optičkog mikroskopa; epoksidna smola, polistirenska smola, izobutilenska smola i smola rastvorljiva u vodi koriste se kao sredstva za ugradnju preseka elektronskog mikroskopa.
Kako bi se osiguralo da vidno polje mikroskopa može biti ravnomjerno i potpuno osvijetljeno, optički sistem osvjetljenja mora biti podešen kada se mikroskop prvi put instalira i otklanja greške. Ovo je važno sredstvo i najosnovniji način da se mikroskop pravilno koristi i dobiju tačni i pouzdani rezultati. zahtjevi. Osim toga, pravilno ovladavanje podešavanjem sistema optičkih putanja osvjetljenja je neophodan korak nakon zamjene sijalice izvora svjetlosti tokom korištenja mikroskopa, a također je neophodno sredstvo za provjeru performansi mikroskopa s vremena na vrijeme tokom svakodnevnog rada. koristiti. Podešavanje optičkog sistema osvetljenja mikroskopa uglavnom uključuje sledeće četiri stavke: 1. Preliminarno podešavanje komore lampe izvora svetlosti izvan mikroskopa ① Prvo otvorite kućište komore lampe, pritisnite opružnu kopču da stavite halogenu sijalicu u grlo, te izbjegavajte direktan kontakt sa sijalicom prstima tokom ugradnje (može se odvojiti mekom krpom ili papirom) kako biste izbjegli otiske prstiju i drugu prljavštinu na sijalici, što će uticati na vijek trajanja sijalice. ②Postavite kućište lampe na sto, nakon što uključite struju, pomoću specijalnog odvijača podesite otvor na dugmetu za fokusiranje lampe (označen sa "←→"), tako da nit bude projektovana na zid 1-2 m, a slika filamenta je podešena. Zatim podesite visinu lampe i podesite otvor za konac (označen sa "──") kako bi položaj niti bio odgovarajući; zatim podesite levi i desni položaj lampe kako biste podesili otvor za vijak (označen sa "──") kako bi lijevi i desni položaj žarulja bili odgovarajući.
2. Svrha provjere i ispravljanja položaja rasvjete izvora svjetlosti (filamenta) u mikroskopu je da se kraj slike iluminatora podesi pravo u vidno polje sočiva objektiva i da se osigura da vidno polje mikroskop je potpuno i jednoliko osvetljen iz perspektive izvora svetlosti. Osvetljenje, što je preduslov za podešavanje Kuhler sistema osvetljenja. Potreban osnovni alat: Teleskop za centriranje je opremljen kada se mikroskop kupi. ① Odspojite kućište od matiranog stakla iz kućišta lampe i vratite kućište lampe na mikroskop. ② Odaberite sočivo 10× objektiva, uključite program izvora svjetlosti da pronađete uzorak i jasno ga fokusirate, a zatim koristite 40× objektiv objektiva da jasno fokusirate uzorak (40× objektiv. Možete vidjeti cijelu sliku filamenta ); ③ Otvorite otvor dijafragme i membranu polja kondenzatora do maksimuma; ④ Isključite jedan od okulara, zamijenite ga teleskopom za centriranje, uhvatite bijeli dio, razvucite crni okular drugom rukom, možete vidjeti sliku niti u vidnom polju; ⑤ Ako položaj filamenta nije prikladan, podesite otvor "──" da podesite sliku filamenta u horizontalnom smjeru i podesite otvor "──" da podesite sliku filamenta u vertikalnom smjeru dok ne podesite sliku niti na svjetlosnu kružnu sliku koja samo ispunjava otvor objektiva; ⑥ Nakon podešavanja, vratite navlaku od matiranog stakla u prvobitni položaj, isključite teleskop za centriranje i zamenite okular za sledeće podešavanje. Gore spomenuto podešavanje komore svjetiljke izvora svjetlosti za osvjetljenje izvan mikroskopa i provjeru položaja svjetlosnog tijela izvora svjetlosti unutar mikroskopa potrebno je izvršiti samo kada je mikroskop prvi put instaliran i otklonjen i kada je sijalica zamijenjena , a mikroskop se ne može nasumično podesiti kada se koristi mikroskop. U slučaju zabune, može se vratiti u prvobitno stanje prema gore navedenim koracima.
3. Ispravno podešavanje Kohler sistema osvetljenja Jedan od glavnih zadataka ispravnog podešavanja mikroskopa je podešavanje optičkog sistema putanje osvetljenja, a ključno je podešavanje Kohler sistema osvetljenja. Za svaku osobu koja koristi mikroskop, posebno onu koja radi mikroskop, trebalo bi da ima određeno razumijevanje i vladanje principa Kuhlerovog sistema osvjetljenja i njegovih koraka podešavanja kako bi omogućio punu igru funkcijama mikroskopa i fotografirao. Fotografije koje izlaze mogu biti konzistentnije i savršenije. Princip Kohlerovog sistema osvjetljenja je jednostavan: svjetlost koju emituje bilo koja tačka na izvoru svjetlosti može osvijetliti vidno polje mikroskopa, a svjetlost koju emituje svaka tačka na izvoru svjetlosti se prikuplja, a u polju pogled na mikroskop Postiže se vrlo puno i ujednačeno osvjetljenje. Svrha podešavanja Kuhlerovog sistema rasvjete je da se dobije ujednačeno i dovoljno osvjetljenje za posmatrano vidno polje, te da se spriječi da zalutalo svjetlo utječe ili ometa sistem za snimanje, kako bi se izbjeglo zamagljivanje filma tokom fotografiranja. Neophodne komponente za Kohler sistem osvetljenja sa visokim podešavanjem: dijafragma polja, sistem kondenzatorskih sočiva koji se može podesiti na osi. ① Odaberite 10× objektiv objektiva i 10× okular ② Stavite prednje sočivo kondenzatora u optički put, podesite dijafragmu blende na umjerenu poziciju (ne preveliku ili malu), zatim podignite kondenzator na gornji položaj, i podesite okretnu ploču kondenzatora na položaj "J" Bright field ③ Podesite dijafragmu polja na minimum (0,1)
④ Stavite zatvoreni biološki uzorak na binu, uključite izvor svjetlosti i jasno fokusirajte
⑤ U vidnom polju će biti djelomično osvijetljeno područje ili svijetla tačka, što je zamućena slika dijafragme polja, na kojoj se jasno mogu vidjeti detalji uzorka; izvan njega je tamnije vidno polje, koje ne mora nužno da jasno vidi detalje uzorka
⑥Lagano podesite kondenzator nadole, tako da se svetla tačka u vidnom polju postepeno smanjuje i postepeno postaje jasna poligonalna slika, što je jasna slika dijafragme polja;
⑦Generalno, poligonalna slika nije u centru vidnog polja, te je potrebno podesiti par vijaka za centriranje kondenzatora da bi se poligonalna slika dijafragme polja podesila na centralnu poziciju;
⑧Postepeno otvarajte dijafragmu vidnog polja kako biste poligonsku sliku učinili upisanim poligonom vidnog polja i dalje provjerite status poravnanja. Ako poravnanje nije idealno, nastavite s finim podešavanjem zavrtnja za poravnanje;
⑨Malo otvorite dijafragmu vidnog polja, tako da njena poligonalna slika samo nestane na ivici vidnog polja. Do sada je završeno podešavanje Kohler sistema osvjetljenja. Nakon podešavanja Kohlerovog sistema osvjetljenja, cijelo vidno polje je ravnomjerno osvijetljeno, a snimljeni mikrosnimci su svijetli i jasni sa normalnim kontrastom.
