Metode pripreme uzoraka za optičku i elektronsku mikroskopiju filmova
Metoda mikrofilmiranja općenito uključuje četiri kategorije: metodu sečenja, metodu cjelokupnog zaptivanja, metodu premaza i metodu presovanja.
①Slice metoda. Optički mikroskop debljine kriške između 2 do 25 mikrona, opći biljni i životinjski materijali, kriška je debljine oko 10 mikrona je prikladna. Metoda sekcije varira u zavisnosti od različitih sredstava za ugradnju. Obično se koriste metoda parafinskog presjeka, metoda sekcije pamučnog ljepila, metoda zamrznutog rezanja i metoda glikol metakrilata (koja se naziva GMA metoda). Metoda sekcije parafina uključuje korake fiksiranja, ugradnje, sečenja, bojenja, dehidracije i zatvaranja. Ključno je da se biomaterijal ugradi u parafinski vosak i da se parafinski vosak koristi kao potpora za rezanje biomaterijala uronjenog u blok voska na idealne tanke kriške. Proces rada je sljedeći: fiksiranje → pranje vodom → korak po korak od niske do visoke koncentracije alkoholne dehidracije → prozirnost ksilena → potapanje u vosak → ugrađivanje → sečenje → krpljenje → deparatiranje ksilenom → korak po korak od visoke do niske koncentracije tretman alkoholom, i konačno prelazak na vodu → bojenje → korak po korak od niske do visoke koncentracije alkoholne dehidracije → prozirnost ksilena → zaptivanje smolnim ljepilom. Osnovni koraci su isti u svim vrstama tehnika snimanja filmova.
② Integralna metoda zaptivanja. Koristi se za pojedinačne ćelije, male organizme ili dispergirane organe metodom cijelog montiranog filma. Ova metoda također zahtijeva različite korake fiksacije, bojenja, dehidracije, transparentnosti i zaptivanja. Ova metoda se koristi za pripremu usnih organa čipkarica i insekata.
Metoda razmazivanja. Metoda pripreme u kojoj se biološki uzorak koji se lako raspršuje nanosi na stakalcu. Primjer je bris krvi.
④Način pritiskanja. Prirodna, lako dispergirajuća tkiva ili tkiva koja se lako raspršuju nakon tretmana, kao što su životinjski spermatociti, ćelije vrhova korijena, itd. na stakalcu, plus pokrovni stakal, a zatim na silu zgnječite tkiva, tako da se ćelije ili unutarćelijske strukture šire u sloj metoda snimanja. Metoda presovanja se često koristi za posmatranje hromozoma, obično obojenih magenta acetatom, crvenim lišajem i crvenom karbonskom kiselinom.
