Razlika između običnog svjetlosnog mikroskopa i fluorescentnog mikroskopa
Optički mikroskop: To je optički instrument koji koristi optičke principe za uvećanje i slikanje sićušnih objekata koje ljudsko oko ne može razlučiti, tako da ljudi mogu izvući informacije o mikrostrukturi.
Fluorescencijski mikroskop: Fluorescencijski mikroskop koristi ultraljubičasto svjetlo kao izvor svjetlosti da ozrači predmet koji se pregleda kako bi emitovao fluorescenciju, a zatim promatra oblik i lokaciju objekta pod mikroskopom. Fluorescentna mikroskopija se koristi za proučavanje apsorpcije i transporta supstanci u ćelijama, distribucije i lokalizacije hemijskih supstanci, itd. Neke supstance u ćelijama, kao što je hlorofil, mogu fluorescirati nakon zračenja ultraljubičastim zracima; iako neke tvari same po sebi ne mogu fluorescirati, one također mogu fluorescirati nakon što su obojene fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitijelima nakon što su ozračene ultraljubičastim zracima. Fluorescentna mikroskopija je jedan od alata za kvalitativna i kvantitativna istraživanja takvih supstanci.
Optički mikroskop se općenito sastoji od pozornice, sistema reflektora, objektiva, okulara i mehanizma za fokusiranje. Promjenom metode osvjetljenja, sistem osvjetljenja reflektora može dobiti različite metode posmatranja kao što su tamne tačke objekta na svijetloj pozadini (koje se nazivaju svijetlo svjetlo polja) ili svijetle točke objekta na tamnoj pozadini (zvane tamno svjetlo polja), kako bi bolje otkrili i promatrati mikrostrukture u različitim situacijama.
Fluorescencijski mikroskopi se razlikuju od običnih mikroskopa na sljedeće načine:
1. Metoda osvjetljenja je obično episkopska, odnosno izvor svjetlosti se projektuje na uzorak kroz sočivo objektiva;
2. Izvor svjetlosti je ultraljubičasto svjetlo, valna dužina je kraća, a rezolucija je veća od one kod običnih mikroskopa;
3. Postoje dva specijalna filtera, onaj ispred izvora svjetlosti služi za filtriranje vidljive svjetlosti, a onaj između okulara i objektiva se koristi za filtriranje ultraljubičastih zraka radi zaštite ljudskih očiju.
Fluorescencijski mikroskop je također vrsta optičkog mikroskopa, glavna razlika je u tome što je talasna dužina pobuđivanja različita. Ovo određuje razliku između fluorescentnog mikroskopa i običnog optičkog mikroskopa u smislu strukture i upotrebe.
Fluorescentna mikroskopija je bitan alat u imunofluorescentnoj citohemiji. Sastoji se od glavnih komponenti kao što su izvor svjetlosti, sistem filterskih ploča i optički sistem. To je korištenje određene talasne dužine svjetlosti da se uzorak potakne da emituje fluorescenciju i da se posmatra fluorescentna slika uzorka pojačavanjem sočiva objektiva i sistema okulara.
