(Razlike između (dvofotonskih, konfokalnih) fluorescentnih mikroskopa i običnih mikroskopa
Fluorescentni mikroskop je upotreba ultraljubičastog svjetla kao izvora svjetlosti, koji se koristi za ozračivanje predmeta koji se ispituje, tako da predmet emituje izvor svjetlosti, a zatim se posmatranje objekta vrši pod mikroskopom. Uglavnom se koristi za imunofluorescentne ćelije, koje se uglavnom sastoje od izvora svetlosti, sistema filterskih ploča i optičkog sistema za posmatranje fluorescentne slike uzoraka kroz uvećanje okulara i objektiva. Pogledajmo kakva je razlika između fluorescentnog mikroskopa i običnog optičkog mikroskopa.
1, u režimu osvetljenja
Osvetljenje fluorescentnog mikroskopa je uglavnom padajućeg tipa, to jest, izvor svetlosti je kroz objektiv objektiva koji se stavlja na ispitni uzorak.
2, u rezoluciji
Fluorescencijski mikroskop koristi ultraljubičasto svjetlo kao izvor svjetlosti, valna dužina je relativno kratka, ali je rezolucija veća od običnog optičkog mikroskopa.
3, razlika u filteru
Fluorescencijski mikroskop je upotreba dva posebna filtera, ispred izvora svjetlosti se koristi za filtriranje vidljive svjetlosti, između objektiva i okulara za filtriranje ultraljubičastog svjetla, koje može zaštititi ljudsko oko.
Fluorescencijski mikroskop također pripada vrsti optičkog mikroskopa, uglavnom je talasna dužina pobuđivanja fluorescentnog mikroskopa kratka, tako da je to dovelo do konstrukcije različite strukture fluorescentnog mikroskopa i običnog mikroskopa i upotrebe različitih, fluorescentnog mikroskopa većina ima dobro hvatanje slabe svjetlosne funkcije, tako da u izuzetno slaba fluorescencija, to je sposobnost snimanja i dobra. Zajedno sa kontinuiranim poboljšanjem fluorescentnog mikroskopa posljednjih godina, buka je također značajno smanjena. Stoga se sve više primjenjuje fluorescentni mikroskop.
Dvofotonski fluorescentni mikroskop ima mnoge prednosti:
(1) Rasipanje manje utiče na duže talasne dužine svetlosti nego što kraće talasne dužine svetlosti lako prodiru u uzorak;
(2) Fluorescentni molekuli izvan fokalne ravni nisu pobuđeni tako da više pobudne svjetlosti može doći do fokalne ravni, tako da ekscitacijsko svjetlo može prodrijeti dublje u uzorak;
3) Duže talasne dužine bliske infracrvene svetlosti su manje toksične za ćelije od kraćih talasnih dužina;
4) Kada se za posmatranje uzorka koristi dvofotonski mikroskop, fotoizbjeljivanje i fototoksičnost prisutni su samo u fokalnoj ravni. Stoga su dvofotonski mikroskopi prikladniji od jednofotonskih mikroskopa za posmatranje debelih uzoraka, za posmatranje živih ćelija ili za provođenje eksperimenata fotoizbjeljivanja na licu mjesta.
