Eksperimentalni postupak za direktnu mikrobiološku mikroskopsku metodu brojanja
1. Razblaživanje
Suspenzija Saccharomyces cerevisiae za odgovarajuće razrjeđivanje, bakterijska tekućina, na primjer nije gusta, ne može se razrijediti.
2. Zrcalna inspekcija komore za brojanje
Prije dodavanja uzoraka, prvo treba pregledati komoru za brojanje ploče za brojanje. Ako ima prljavštine, potrebno je očistiti prije brojanja.
3. Dodavanje uzorka
Čista i suha hematokritna ploča prekrivena pokrovnim stakalcem, a zatim aseptičnom biretom s finim usnama razrijedi se tekućina pivskog kvasca sa ruba pokrovnog staka (ne smije biti previše), tako da bakterijska tekućina duž otvora kapilarnom infiltracijom u komora za brojanje, opća komora za brojanje može se napuniti bakterijskom tekućinom. Imajte na umu da ne bi trebalo biti mjehurića zraka.
4. Brojanje mikroskopom
Nakon mirovanja od 5 minuta, postavite ploču za brojanje krvi na držač mikroskopa, prvo pronađite lokaciju komore za brojanje sa malim povećanjem, a zatim promijenite na veliko povećanje za brojanje. Ako se otkrije da je bakterijska tekućina pregusta ili prerijetka prije brojanja, razrjeđenje se mora podesiti prije brojanja. Generalno, razrjeđivanje uzorka zahtijeva oko 5-10 organizama u svakoj maloj ćeliji. Za svaku komoru za brojanje, broje se organizmi u 5 srednjih odjeljaka (mogu se odabrati 4 ugla i centar srednjeg odjeljka). Bakterije koje se nalaze na linijama mreže uglavnom se broje samo na gornjoj i desnoj liniji. U slučaju pupanja kvasca, broje se dva organizma ako je tijelo pupanja upola manje od roditeljske ćelije. Brojanje uzorka iz dvije komore za brojanje radi brojanja vrijednosti za izračunavanje sadržaja bakterija u uzorku.
5. Čišćenje hematokritne ploče
Nakon upotrebe, ploču za brojanje krvnih zrnaca u kavezu s vodom isperite vodenim stupcem, nemojte koristiti tvrde predmete za pranje i četkanje, pranje i sušenje ili sušenje fenom. Mikroskopski pregledajte ploču i uočite ima li ostataka organizama ili drugih taloga u svakom malom odjeljku. Ako nije čist, pranje se mora ponavljati dok ne bude čist.
