Eksperimentalni koraci metode direktnog brojanja mikroorganizama pod mikroskopom
1. Razrjeđivanje
Razblažite suspenziju kuhanja kvas na odgovarajući način. Ako se bakterijsko rješenje nije koncentrirano, ne treba ga razrijediti.
2. Soba za brojanje inspekcije ogledala
Prije dodavanja uzoraka, provedite mikroskopski pregled komore za brojanje brojevnog odbora. Ako postoji prljavština, treba ga očistiti prije brojenja.
3. Dodajte uzorke
Pokrijte čistu i suvu ploču za prevlačenje krvnih zrnaca, a zatim koristite sterilnu kapljicu za fino unošenje (ne previše) razrijeđenog tekućina kvasaca s ruba poklopca, omogućujući bakterijsku tekućinu u ulaz u prostor za brojanje kroz kapilarno proterivanje duž jaza. Općenito, soba za brojanje može se napuniti bakterijskom tečnošću. Pazite da ne proizvedete mjehuriće.
4. Brojanje mikroskopa
Nakon stojećih 5 minuta, stavite ploču za brojanje krvnih ćelija na fazu mikroskopa, prvo koristite mikroskop sa malim napajanjem da biste pronašli komoru za brojanje, a zatim prebacite na mikroskop velike snage za brojanje. Ako se utvrdi da je bakterijsko rješenje previše koncentrirano ili previše razblaženo prije brojenja, razrjeđivanje treba prilagoditi prije brojenja. Opći zahtjev za razrjeđivanje uzorka je oko 5-10 bakterijske ćelije po malom rešetku. Odaberite 5 ćelija iz svake sobe za brojanje (opcionalni 4 uglova i centralne ćelije) za brojanje. Bakterijske ćelije koje se nalaze na mrežnoj liniji uglavnom se računaju samo na gornje i desne linije. Kad klice kvasaca i veličina pupoljka doseže polovinu matične ćelije, uzimaju se dva bakterijska računa. Brojanje uzorka zahtijeva dobivanje vrijednosti iz dvije komore za brojanje za izračunavanje bakterijskog sadržaja uzorka.
5. Očistite hemocitometar
Nakon upotrebe, isperite hemocitometar sa vodenim stupcem na slavini. Ne perite tvrdim predmetima. Nakon pranja, zrak se osuši ili suši sušilo sa sušilom za kosu. Mikroskopski pregled, posmatrajte da li postoje preostali bakteriji ili drugi sediment u svakoj maloj ćeliji. Ako nije čisto, mora se popraviti više puta dok se ne očisti.
