Mikroskopi fluorescencija mogu se podijeliti u dvije vrste prema principu optičke staze:
1. Mikroskop prenosa fluorescencije
Stariji mikroskopi fluorescencija koriste pažnju u centru pažnje da potaknu fluorescenciju prenošenjem izvora ekscitacije kroz materijal za uzorke. Njegova prednost je snažna fluorescencija pri niskom uvećanju, ali njegov nedostatak je da njegova fluorescencija opada sa povećanjem povećanja. Dakle, pogodan je samo za posmatranje većih materijala uzoraka.
2. Pad mikroskopa za fluorescenciju
Svjetlo uzbuđenja pada iz objektivnih objektiva na površinu uzorka, koristeći isti objektivni objektiv kao kondenzator osvjetljenja i objektivni objektiv za sakupljanje fluorescencije.
Dvostruko razdjelnik u boji (dihroični ogledalo) treba dodati u optički put koji tvori ugao od 45 stepeni sa optičkim osi. Svjetlost uzbuđenja odražava se u objektivne objektive i fokusirana na uzorak. Fluorescencija koju stvara uzorak, kao i uzbuđenje koje se odražava od površine objektivnih objektiva i poklopca unesite objektivne objektive u isto vrijeme i vratite se u razdjelnik s dvostrukim bojama da biste odvojili uzbudljivu svjetlost i fluorescenciju. Preostala uzbuđenje se zatim blokira apsorpcijom filtera. Ako se koriste različite kombinacije uzbudljivih filtera, dvostrukih boja u boji, i blokiranje filtera, mogu udovoljiti potrebama različitih fluorescentnih reakcijskih proizvoda.
Prednosti ovog fluorescentnog mikroskopa su ujednačeno osvjetljenje polja, čistog snimanja i jača fluorescencija s većim uvećanjem.
3. Fazni kontrastni mikroskop
Fazni kontrastni mikroskop je mikroskop koji može pretvoriti faznu razliku (ili razliku optičke staze) generirana kada svjetlost prolazi kroz objekt u amplitudu (intenzitet svjetla) promjene. Uglavnom se koristi za posmatranje živih ćelija, neobičnih dijelova tkiva ili obojenih uzoraka koji nedostaju kontrast.
Ljudsko oko može razlikovati promjene u talasnoj dužini (u boji) i amplitude vidljive svjetlosti, ali ne mogu razlikovati promjene u fazi. Većina bioloških primjeraka je vrlo prozirna, a amplituda lakih valova i dalje je u osnovi nepromijenjena nakon prolaska, sa promjenama sa samo fazom.
Faza kontrast mikroskop u osnovi pretvara optičku stazu razliku vidljivog svjetla koja prolazi kroz uzorke u razliku od amplitude, čime se poboljšava kontrast između različitih struktura i čineći ih jasnim i vidljivim. Nakon prolaska kroz uzorak, svjetlost podvrgava refrakciju, odstupajući od izvornog optičkog puta i odgođen za 1/4 λ (talasna dužina). Ako se razlika optička staza povećava ili smanjuje za drugu 1/4 λ, razlika optičke staze postaje 1/2 λ, a miješanje između dvije svjetlosne grede povećava ili smanjuje nakon što se osi kombinira, poboljšavajući kontrast.
