Funkcije svakog filtera u fluorescentnom mikroskopu
Najkritičniji problem kod fluorescentne mikroskopije je kombinacija optičkih filtera. I filter ekscitacije i filter za zaštitu moraju biti prikladni za posmatrani fluorescentni materijal i međusobno usklađeni. Za neke specifične aplikacije, ako postoje greške u odabiru filtera, to može dovesti do nesporazuma, pa čak i do netočnih rezultata. Dostignuća tehnologije fluorescentne mikroskopije neodvojiva su od visoko-filtera visokog kvaliteta i pametno usklađenih grupa filtera. Postoji nekoliko vrsta filtera za fluorescentnu mikroskopiju.
1. Filter koji apsorbira toplinu
Filter koji apsorbuje toplotu je neophodan filter kako bi se sprečilo da toplotno zračenje u spektru izvora svetlosti ošteti optički sistem. Rani napredni mikroskopi bili su opremljeni bocama u obliku bubnja koje su mogle držati destilovanu vodu kao uređaje za apsorpciju toplote. Moderni istraživački mikroskopi velikih -razmjera opremljeni su staklenim filterima koji apsorbiraju toplinu u svjetlosnim kutijama izvora svjetlosti ili komorama za lampe, koje su prozirne i blago žute staklene ploče. Leitz-ovi KG1 (2 mm) i BG38 (4 mm) filteri mogu prenijeti gotovo sve ultraljubičaste i vidljive spektre svjetlosti, sa stopom propuštanja svjetlosti do 98%. On samo selektivno apsorbuje infracrveno fototermalno zračenje.
2. Filter pobude
Filteri za pobuđivanje mogu selektivno apsorbirati spektralne linije duge valne dužine i samo propuštati ultraljubičasto svjetlo. Ljubičasti, plavi i zeleni filteri su ekscitacioni filteri. Zeiss, Reichert, Olympusova B serija, G serija, BG serija, Shottova UG serija, Optonova H, G, BP serija, Leitzova BP serija i drugi optički filteri su svi filteri pobude.
3. Filter za blokiranje
Blokirajući filter je filter koji selektivno apsorbuje kratkotalasne spektralne linije i infracrvene zrake dok dozvoljava da se vide duži talasi. Njegova funkcija je da omogući posmatraču da vidi fluorescenciju pobuđenu predmetom koji se pregleda, a istovremeno štiti rožnjaču posmatrača od UV oštećenja.
4. Filter za razdvajanje boja
Filter za razdvajanje boja je ogledalo filtera koje reflektuje pobudnu svjetlost na objekt koji se pregledava, uzrokujući da predmet emituje fluorescenciju, a zatim prenosi fluorescenciju do okulara. Ovaj tip filtera može se koristiti samo u kondenzatoru padajućeg svjetla, dok fluorescentni mikroskop za prolaznu svjetlost ne zahtijeva odvajanje boja.
5. Filter za smetnje
Interferentni filter je vrsta ekscitacionog filtera{0}}visokih performansi. To je filter napravljen slaganjem nekoliko tankih metalnih filmova između dva polirana staklena lista. Indeks loma svakog tankog metalnog filma je različit, tako da se spektralne linije različitih valnih dužina izvora svjetlosti osvjetljenja više puta reflektiraju na svakom metalnom filmu. Neke spektralne linije određenih talasnih dužina se poništavaju destruktivnim smetnjama, dok su druge ojačane aditivnim smetnjama i prenose se kroz njih. Ovo rezultira filterom sa uskim spektrom transmisije i širinom pola vrha od samo 6-20 nm. Propustljivost može doseći 60% -70%.
