Metode snimanja za svijetla i tamna polja fluorescentne mikroskopije
(1) Snimanje svijetlog polja (BFI), koje dozvoljava samo prenošenim elektronima u paraksijalnom području da prođu kroz otvor objektiva, formirajući tamnu sliku na svijetloj pozadini. Što je manji otvor objektiva, veći je kontrast slike u svijetlom polju; (2) Snimanje tamnog polja (DFI), koje dozvoljava samo dijelu raspršenog snopa velikog ugla ili difrakcijske zrake kristala da prođe kroz otvor sočiva objektiva, dok blokira propušteni snop. Ovo stvara svijetlu grafičku sliku na tamnoj pozadini. Ova metoda snimanja tamnog polja može poboljšati kontrast slika i važna je metoda snimanja.
Postoje otprilike četiri metode za fluorescentnu mikroskopiju za postizanje slike tamnog polja: (1) održavanje vertikalnog osvjetljenja duž optičke ose dok se pomiče otvor objektiva; (2) Upotreba kosog osvjetljenja za dobijanje raspršenih zraka u smjeru optičke ose naziva se Center Dark Field Imaging (CDFI); (3) Otvor objektiva sa centralnim blokiranjem zraka i kružnom providnom površinom; (4) Koristite kružni prozirni reflektor za detekciju svjetlosti i otvor objektiva sa centralnom kružnom rupom. Metode * ovdje su jednostavne i zgodne, ali koriste elektroničku sliku u području udaljenog rukava, što rezultira velikim aberacijama i lošim kvalitetom slike. Druga metoda može izbjeći gore navedene nedostatke, ali objektivni otvor Leica fluorescentnog mikroskopa prima samo mali dio raspršenih difraktiranih elektrona, što rezultira manjom efikasnošću. Strana otvora blende često je bombardovana velikim brojem elektrona, što lako može izazvati asimetrično zagađenje i uticati na kvalitet slike. U tom smislu je poboljšan kružni cilj, ali nedostatak je što ga je teško napraviti i teško postići potpunu aksijalnu simetriju. S obzirom na relativno opuštene zahtjeve za sistem rasvjete, može se usvojiti potonje rješenje, koje uključuje dodavanje kružnog otvora na kondenzatoru kako bi se obezbijedilo šuplje osvjetljenje uzorka. Efekat ovog uređaja. Njegova rezolucija slike može biti bliska rezoluciji slika u svijetlom polju, dok je kontrast znatno poboljšan.
