Važne optičke specifikacije za mikroskopiju
Numerički otvor blende je ključni indikator za procjenu performansi objektiva (snaga razlučivanja, dubina fokusa i širina polja). Numerički otvor (NA) se izračunava po sljedećoj formuli: \\(NA.=n\\puta \\sin x\\)
n=indeks prelamanja medija između uzorka i sočiva objektiva; \\(n=1\\) za zrak, \\(n=1.515\\) za ulje za potapanje; x=poluugao svetlosnog stošca formiranog od prelomljene svetlosti od optičke ose do ivice sočiva objektiva.
U mikroskopskom posmatranju, ako želite da povećate vrednost NA, ugao otvora blende se ne može povećati. Efikasna metoda je povećanje indeksa prelamanja n medija. Na osnovu ovog principa razvijeni su ciljevi za uranjanje u vodu i ciljevi za uranjanje u ulje. Pošto je indeks loma n medija veći od 1, NA vrijednost može biti veća od 1.
Maksimalna vrijednost numeričkog otvora je 1,4, što dostiže granicu i teoretski i tehnički. Trenutno se kao medij za uranjanje koristi bromonaftalen sa visokim indeksom prelamanja. Indeks loma bromonaftalena je 1,66, tako da NA vrijednost može biti veća od 1,4.
Mora se istaći da da bi se omogućila potpuna igra numeričkog otvora objektiva, NA vrijednost kondenzatora mora biti jednaka ili malo veća od NA vrijednosti sočiva objektiva tokom posmatranja.
Numerički otvor blende je usko povezan sa drugim tehničkim parametrima i gotovo određuje i utiče na druge tehničke parametre. Proporcionalno je snazi razlučivanja i uvećanju, i obrnuto proporcionalno dubini fokusa. Kada se NA vrijednost poveća, širina polja i radna udaljenost će se smanjiti u skladu s tim.
II. Resolving Power
Snaga razlučivanja, koja se naziva i "rezolucija", još je jedan važan tehnički parametar za mjerenje performansi mikroskopa.
Formula snage razlučivanja mikroskopa izražava se kao: \\(d=\\lambda/NA\\)
Gdje je d=minimalna riješena udaljenost; \\(\\lambda\\)=talasna dužina svetlosti; NA.=numerički otvor sočiva objektiva. Može se vidjeti da je moć razlučivanja sočiva objektiva određena sa dva faktora: NA sočiva objektiva i talasnom dužinom izvora svjetlosti osvjetljenja. Što je veća NA vrijednost i kraća talasna dužina svjetlosti osvjetljenja, to je manja vrijednost d i veća je moć razlučivanja.
