Metoda izrade mikroskopskih stakala
Postoje tri metode za pravljenje mikroskopskih pločica:
1. Metoda razmaza
Metoda razmazivanja je metoda pripreme u kojoj se materijal ravnomjerno raspoređuje na stakalcu.
Materijali za razmazivanje uključuju jednoćelijske organizme, male alge, krv, bakterijske kulture, rastresita tkiva biljaka i životinja, gnijezda sperme, prašnike itd.
Prilikom razmazivanja treba obratiti pažnju na:
(1) Tobogan mora biti čist.
(2) Tobogan treba držati ravno.
3) Premaz mora biti ujednačen. Nanesite kapljicu tekućine za premazivanje desno od sredine stakalca i dobro je razmažite oštricom noža za seciranje ili čačkalicom, itd.
4) Premaz treba da bude tanak. Upotrijebite drugi tobogan kao potiskivač, lagano gurnite s desna na lijevo duž površine stakalca s kapljicom otopine za nanošenje (ugao između dva klizača treba da bude 30 do 45 stepeni), i nanesite ravnomjerno tanak sloj.
5) Fiksacija. Ako je potrebna fiksacija, koristite hemijsku fiksaciju ili isušivanje (bakterijsku) fiksaciju.
6) Bojenje. Koristite metilen plavo za bakterije i Rachelinu mrlju za krv. Otopina za bojenje treba pokriti cijelu premazanu površinu.
7) Isperite. Upijajte na upijajući papir ili pecite suvo.
8) Zapečatite foliju. Za dugotrajno skladištenje koristite kanadsku foliju za drvo.
2. Metoda presovanja filma
Metoda filma pod pritiskom je biološki materijal koji se postavlja između stakalca i pokrovnog lista, primjenom određenog pritiska, ćelije tkiva će se razdvojiti metodom pripreme.
(1) uzeti materijal. Posmatranje diobe stanica, diobe stanica treba odabrati bujne, svježe ćelije tkiva kao materijale. Kao što su vrhovi korena, meristematsko tkivo vrha stabljike, ćelije koštane srži, prašnici (ćelije majke polena). Gnijezdo spermatozoida (spermatogonije) i tako dalje.
(2) Fiksacija. Fiksacija materijala se može odrediti prema potrebi, odmah nakon uzimanja materijala za promatranje tlačnog filma, ne može se napraviti odvojeni fiksni tretman (i bojenje sinhrono); Uzmite materijal nije odmah nakon pregleda, materijal se može fiksirati fiksativom (uglavnom alkoholnim acetatnim fiksativom). Fiksno 2 ~ 24 sata (u zavisnosti od materijala) nakon pranja sa 95% etanola, konzervirano u 70% etanolu, pripravnost.
(3) Disocijacija. Ćelije nije lako raspršiti materijal otopinom za odvajanje hidrolizom (kao što je 1N HCl ili klorovodična kiselina ili otopina alkohola), opći tretman 6 ~ 20 min, nakon disocijacije i ispiranja vodom prije bojenja.
(4) Bojenje. Postoji mnogo vrsta mrlja. Posmatranje hromozoma se obično koristi za bojenje rastvorom za bojenje magenta acetatom.
(5) Prešanje filma. Stavite materijal na stakalce, dodajte kap vode ili otopine za bojenje, pokrijte pokrovno stakalce i nježno pritisnite stakalcu palcem.
(6) Zapažanje. Nakon pritiskanja filma, može se posmatrati pod mikroskopom.
