Promatranje bakterija treba obaviti pomoću optičkog mikroskopa
Kao precizan instrument za uvećanje i posmatranje objekata, optički mikroskopi mogu posmatrati različite vrste uzoraka. Korisnici u industrijama kao što su istraživanje mikroba, istraživanja biljaka i istraživanja na životinjama moraju vidjeti razinu veličine bakterija. Stoga, kada posmatrate takve uzorke, kakav mikroskop treba koristiti? Ovaj članak pruža detaljnu analizu.
Odgovor na ovo pitanje može se raspravljati s aspekata kao što su veličina bakterijskog tijela, rezolucija ljudskog oka i mikroskop.
1. Veličina bakterijskih tijela je općenito u mikrometarskoj skali, uzimajući za primjer Escherichia coli: dužina je oko 1um, a širina je oko 0.5um.
2. Rezolucija se odnosi na malu udaljenost između dvije tačke objekta koje se mogu jasno razlikovati.
Rezolucija mikroskopa se odnosi na malu udaljenost između dvije točke objekta koje se mogu jasno razlikovati nakon što ih mikroskop uveća i snimi.
Rezolucija instrumenta se odnosi na njegovu sposobnost da pruži informacije o mikrostrukturi mjerenog objekta. Što je veća rezolucija, to su informacije detaljnije. Pojačanje iznad granice pojačanja naziva se nevaljano pojačanje, koje ne može pružiti detaljnije informacije o strukturi.
3. Rezolucija ljudskog oka je 0.1mm, što znači da pod dovoljno svjetla i udaljenosti od 1 stope, minimalna udaljenost koju ljudsko oko može razlikovati između dvije tačke je 0.1mm .
4. Ukratko, da biste vidjeli prisustvo bakterija, uvećanje mora biti najmanje 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5=200 puta. Međutim, pri ovom povećanju, bakterije (Escherichia coli) koje se vide su samo mala tačka, a da bi se videle detaljnije informacije o strukturi, potrebno je povećati uvećanje mikroskopa.
5. Rezolucija običnog optičkog mikroskopa ograničena je talasnom dužinom vidljive svjetlosti (390-770nm) i općenito ne prelazi 1000 puta, što je granica pojačanja običnog optičkog mikroskopa. Uvećanje veće od 1000 puta ne može dati detaljnije strukturne informacije, što je u okviru neefikasnog pojačanja.
6. Uvećanje elektronskog mikroskopa može dostići 800000 puta, a njegov osnovni princip je isti kao i kod običnog optičkog mikroskopa, koji generiše elektronske talase kratke talasne dužine pod visokim pritiskom.
Zumiranjem od 400 puta (10x, 40x), jedva možete vidjeti bakterije, ali one su veličine samo vrha igle, poput malih tačaka. Općenito, još uvijek zumiramo do 1000 puta (10x, 100x) radi posmatranja, a u ovom trenutku se izgled bakterije i dalje može jasno vidjeti, čak i nakon posebnog bojenja flagela. Uvećanje 1000 puta zahtijeva korištenje uljnog sočiva. Takozvana uljna leća se odnosi na kapanje kapi kedrovog ulja između objektiva i pokrivnog stakla. Indeks loma svjetlosti kedrovog ulja je veći od zraka, tako da se može koristiti veće povećanje.
10x i 40x označavaju da je sočivo uvećano za 10x i 40x. Uvećanje okulara se množi povećanjem sočiva objektiva kako bi se dobilo ukupno povećanje ovog mikroskopa. Okular i sočivo objektiva srednjoškolskog mikroskopa se mogu zamijeniti, a okular je obično 5x ili 10x. Okular malog mikroskopa je obično samo 10x, a pregledan je na E. coli, Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis i Bacillus megaterium (koristi se za posmatranje spora).
