Prethodno ispitivanje i podešavanje fluorescentne mikroskopije:
(1) Prije svakog promatranja fluorescencije, potrebno je rutinski provjeriti poravnanje filamenta, fokusiranje optičke putanje, otvor otvora blende i postavke otvora otvora vidnog polja fluorescentnog uređaja.
(2) Da li su potrebne komponente fluorescentnog pobuđivanja/emisionog filtera ugrađene u pretvarač, da li je objektiv fluorescentnog mikroskopa pravilno konfigurisan i da li su mrlje od ulja i prašina ispred objektiva uklonjene.
(3) Slično, kada se posmatra razlika u propuštenoj svjetlosti, potrebno je provjeriti konjugaciju sočiva za fokusiranje prema centru i kontrastnog prstena sa sočivom objektiva.
(4) Provjerite ima li tekućine ili prašine koja visi na nosaču uzorka (stakleni predmet, pokrovno staklo i druge posude) i da li je debljina unutar raspona radne udaljenosti kalibrirane sočivom objektiva. Narezani uzorci ne bi trebali biti previše debeli, preporučuje se približno manje od ili jednako 10 μm.
(5) Zbog prisustva ultraljubičastih zraka u izvoru osvjetljenja, smeđi suncobran treba postaviti iznad platforme za utovar kako bi se spriječilo UV oštećenje mrežnice.
(6) Nestabilan napon može smanjiti vijek trajanja visokonaponskih živinih sijalica, a na izvor napajanja treba dodati regulator napona.
(7) Da bi se produžio životni vijek živine lampe, može se isključiti samo 15 minuta nakon uključivanja; Kada se fluorescentno napajanje živine lampe isključi, potrebno je pričekati najmanje 10 minuta da se živina para ohladi u prvobitno stanje kada se ponovo pokrene, inače će to utjecati na vijek trajanja lampe.
Posmatranje slika fluorescentnog mikroskopa:
(1) Nakon uključivanja izvora fluorescentne lampe na oko 5-10 minuta, intenzitet ekscitacije teži da se stabilizuje, a uzorak se puni za posmatranje; Kako bi se spriječilo da prekomjerna ekscitacija svjetlosti tokom fokusiranja i traženja slika izazove gašenje fluorescencije uzorka, otvor fluorescentnog mikroskopa se prvo smanjuje ili se dodaje ND filter kako bi se ekscitacija podesila na umjereni intenzitet, a stepen uzorka se pomiče redovno. Nakon određivanja zrcalne slike, ona se podešava na stanje fluorescencije za snimanje.
(2) Podešavanja sa lošim kvalitetom slike. Neophodne mjere prilagođavanja koje se mogu poduzeti, isključujući faktore pripreme uzorka, su:
① Isključite uređaje za zasjenjenje ili ograničavanje u optičkoj putanji slike, kao što su DIC dodaci, ND filteri, itd.
② Ponovo podesite otvor za fokusiranje i otvor blende kolektora fluorescentnog mikroskopa.
③ Pažljivo podesite prsten za korekciju pokrivenosti objektiva fluorescentnog mikroskopa.
