Princip i rad Darkfield mikroskopa
① Mikroskop tamnog polja ima neprozirni graničnik u sredini svog kondenzatora. Sprječava direktnu svjetlost da uđe u sočivo objektiva; prikuplja se samo svjetlost koju reflektuje i difrakuje uzorak. Kao rezultat, pozadina vidnog polja izgleda tamna, dok su rubovi uzorka svijetli. Ovaj mikroskop može otkriti sitne čestice veličine od 4-200 nm, s rezolucijom do 50 puta većom od one kod običnog mikroskopa svijetlog polja.
② Princip Mikroskop tamnog polja je modifikovan od konvencionalnog optičkog mikroskopa zasnovanog na Tyndall efektu. Kondenzator tamnog polja blokira središnji snop od izvora svjetlosti tako da svjetlost ne može da putuje pravo prema gore kroz uzorak do objektiva. Umjesto toga, svjetlost se preusmjerava kako bi se uzorak osvijetlio ukoso. Uzorak odbija ili raspršuje upadnu svjetlost, a raspršena svjetlost ulazi u objektiv, stvarajući tamnu pozadinu po cijelom vidnom polju.
③ Obim primene Mikroskopija tamnog polja se obično koristi za posmatranje neprozirnih uzoraka bez boje. Takvi uzorci imaju indeks prelamanja blizak indeksu okolnog medija i teško ih je razlikovati pod običnim svijetlim poljem osvjetljenja. Osvetljenje tamnog polja poboljšava kontrast između uzorka i pozadine. Može detektovati čestice do 4-200 nm. Međutim, pokazuje samo prisutnost, kretanje i karakteristike površine objekata i ne može razriješiti njihove fine unutrašnje strukture.
④ Operativne procedure
(1) Postavite kondenzator tamnog polja na držač kondenzatora mikroskopa.
(2) Koristite jak izvor svjetlosti. Izbjegavajte direktnu svjetlost koja ulazi u objektiv; obično se koristi namenska lampa za mikroskop.
(3) Stavite kap kedrovog ulja između kondenzatora i stakalca uzorka. Ovo sprečava potpunu unutrašnju refleksiju svetlosti na površini kondenzatora, koja inače ne bi uspela da osvetli uzorak za posmatranje tamnog polja.
(4) Podignite ili spustite kondenzator da fokusirate njegov konusni svjetlosni snop na uzorak. Ako je kondenzator opremljen horizontalnim pomicanjem i kontrolama za centriranje, prvo izvršite centriranje kako biste precizno poravnali optičku os kondenzatora s osom mikroskopa. (5) Odaberite objektiv koji odgovara kondenzatoru, podesite fokus i dovedite sliku ciljnog uzorka na vidjelo.
