Razlozi zbog kojih bakterije treba popraviti prije bojenja u eksperimentima mikroskopije:
Ubijanje ćelija je lakše za bojenje na mrlju.
Napravite bakterije da se pridržavaju staklenih tobogana i ne opterećuju se vodom.
Prilikom popravljanja potrebno je polako sušiti zrak. Ako je potrebno ubrzati postupak, možete ga sušiti nekoliko puta sa udaljenosti iznad plamena alkoholne lampe. Nemojte sušiti stakleni slajd dok se ne zagrije, u suprotnom može oštetiti obrazac za bakterijsku život
Mrljanje grama i mikroskopsko promatranje bakterija
Eksperimentalni princip
Načelo bojenja grama: Različite reakcije bakterija u mrlje gram uzrokovane su razlikama u sastavu i strukturi njihovih ćelijskih zidova. Stanični zid grama pozitivnih bakterija uglavnom se sastoji od mreže peptidoglikana. Kada se tretira etanolom, dehidracija izaziva smanjenje veličine pora i propusnosti mrežne strukture, što otežava da se kristalno ljubičasto jod kompleks bude ispran i zadržan unutar ćelije. Nakon dekolorizacije i kontrastainstva, plava ljubičasta boja početne boje još uvijek se zadržava. Peptidoglycan sloj na ćelijskom zidu gram negativnih bakterija je tanak i ima visok sadržaj lipida. Stoga se, kada se dekoloriziraju, lipid se raspušta u etanolu (ili acetonu), povećavajući propusnost zida ćelije i olakšava pranje kristalnog ljubičastog kompleksa ljubičaste jod. Nakon kontrastaina sa kontrainom, ćelije su obojene crvenom bojom grobnica. Princip snimanja mikroskopa: Moderni obični optički mikroskopi koriste dva skupa sistema objektiva, okulara i objektivne objektive, za uvećanje i sliku, tako da se često nazivaju složenim mikroskopima. U optičkom sistemu mikroskopa, performanse objektivnog sočiva je najkritičnija, a uvećanje uljanog sočiva je najviše, što je najvažnije za mikrobiološka istraživanja. Dodavanje ulja objektiva između staklenog klizača i objektiv uglavnom je za povećanje svjetline osvjetljenja i poboljšanje rezolucije mikroskopa. Korištenje ulja umjesto zraka kao što medij za širenje svjetlosti smanjuje refrakciju ili ukupni odraz svjetla, čineći opaženu sliku jasnije.
