Zahtjevi za proizvodnju uzoraka za fluorescentni mikroskop
（1） Stakleni tobogan
Debljina klizača treba biti između 0.8 i 1.2mm. Ako je klizač predebeo, s jedne strane, apsorbira više svjetla, as druge strane ne može uzrokovati da se pobudna svjetlost skuplja na uzorku. Stakalca mora biti glatka, ujednačene debljine i bez očigledne spontane fluorescencije. Ponekad su potrebni dijapozitivi od kvarcnog stakla.
（2） Poklopac
Debljina pokrovnog stakla je oko 0.17 mm, što je glatko i čisto. Da bi se pojačala ekscitacija, može se koristiti i interferentno pokrivno staklo. Ovo je posebno dizajnirano pokrivno staklo sa nekoliko slojeva supstanci (kao što je magnezij fluorid) koje imaju različite efekte interferencije na različitim talasnim dužinama svjetlosti. Može dozvoliti da fluorescencija nesmetano prolazi, dok refleksijska ekscitacija može uzbuditi uzorak.
（3） Uzorak
Rezovi tkiva ili drugi uzorci ne bi trebali biti predebeli, jer se ekscitacijsko svjetlo uglavnom troši u donjem dijelu uzorka, dok gornji dio koji direktno posmatra sočivo objektiva nije u potpunosti pobuđen. Osim toga, preklapanje ćelija ili maskiranje nečistoća može utjecati na prosuđivanje.
（4） Sredstvo za zaptivanje
Glicerin se obično koristi kao sredstvo za montažu i mora biti bez spontane fluorescencije, bezbojan i providan. Svjetlina fluorescencije je svjetlija pri pH 8,5~9,5 i nije lako brzo izblijediti. Stoga se jednaka mješavina glicerola i 0.5mol/l karbonatnog pufera na pH 9.0-9.5 obično koristi kao sredstvo za zaptivanje.
（5） Ulje za ogledalo
Prilikom promatranja uzoraka pomoću fluorescentnog mikroskopa u tamnom polju i mikroskopa s uljem, potrebno je koristiti ulje za sočiva. Najbolje je koristiti posebno napravljeno nefluorescentno ulje za sočiva, koje se također može zamijeniti glicerolom kao što je gore navedeno. Može se koristiti i tekući parafin, ali je indeks loma nizak i ima blagi utjecaj na kvalitetu slike.
Mjere opreza pri korištenju fluorescentnog mikroskopa
(1) Strogo slijedite zahtjeve fabričkog priručnika za fluorescentni mikroskop i ne mijenjajte program proizvoljno.
(2) Pregled se obavlja u mračnoj prostoriji. Nakon što uđete u mračnu prostoriju, priključite napajanje i upalite živinu lampu ultra visokog pritiska na 5 do 15 minuta. Nakon što izvor svjetlosti emituje jako svjetlo i stabilizira se, oči se potpuno prilagođavaju mračnoj prostoriji prije nego što počnu promatrati uzorak.
(3) Da biste spriječili UV oštećenje očiju, treba nositi zaštitne naočale prilikom podešavanja izvora svjetlosti.
(4) Vrijeme inspekcije treba svaki put biti 1-2 sati. Ako prelazi 90 minuta, intenzitet svjetlosti živine lampe ultravisokog pritiska postepeno se smanjuje i fluorescencija slabi; Nakon izlaganja ultraljubičastom zračenju u trajanju od 3-5 minuta, fluorescencija uzorka je također značajno smanjena; Dakle, ne bi trebalo da prelazi najviše 2-3 sati.
(5) Životni vijek izvora svjetlosti fluorescentnog mikroskopa je ograničen, a uzorak treba pregledati centralno kako bi se uštedjelo vrijeme i zaštitio izvor svjetlosti. Kada je vruće vrijeme, potrebno je dodati električni ventilator za odvođenje topline i hlađenje. Prilikom zamjene nove sijalice vrijeme korištenja treba evidentirati od početka. Kada je lampa isključena i želi da se ponovo koristi, mora sačekati da se sijalica potpuno ohladi pre nego što se upali. Izbjegavajte višestruko paljenje izvora svjetlosti.
(6) Posmatrajte uzorak odmah nakon bojenja, jer se fluorescencija postepeno smanjuje tokom vremena. Ako se uzorak čuva u polietilenskoj plastičnoj vrećici na 4 stepena, to može odgoditi vrijeme slabljenja fluorescencije i spriječiti isparavanje sredstva za montažu.
(7) Standard prosuđivanja za svjetlinu fluorescencije općenito je podijeljen na četiri nivoa, odnosno "jedan" - nikakva ili vidljiva slaba fluorescencija. plus - Može se vidjeti samo jasno vidljiva fluorescencija. plus plus - Vidljivo sa jakom fluorescencijom. ' plus plus plus ' - Vidljiva i zasljepljujuća fluorescencija.
