Metode obrade uzoraka i koraci za elektronsku mikroskopiju
Prije upotrebe transmisionog elektronskog mikroskopa za promatranje bioloških uzoraka, uzorci moraju biti prethodno obrađeni. Naučnici koriste različite metode obrade kako to zahtijevaju različiti zahtjevi istraživanja.
Fiksacija: Kako bi se uzorak sačuvao što je više moguće, glutaraldehid se koristi za stvrdnjavanje uzorka, a osmička kiselina se koristi za bojenje masti.
Hladna fiksacija: Uzorak se brzo zamrzava u tekućem etanu tako da voda ne kristalizira i umjesto toga formira amorfni led. Ovako sačuvani uzorci imaju manje oštećenja, ali je kontrast slike vrlo nizak.
Dehidracija: Koristite etanol i aceton da zamijenite vodu.
Padded: Uzorak se može podijeliti nakon što je podstavljen.
Segmentacija: Uzorak se reže na tanke kriške pomoću dijamantske oštrice.
Bojenje: Teški atomi poput olova ili urana jače raspršuju elektrone od lakših atoma i stoga se mogu koristiti za povećanje kontrasta.
Prije upotrebe transmisionog elektronskog mikroskopa za promatranje metala, uzorak mora biti
Virusi pod elektronskim mikroskopom
Rezanje na vrlo tanke kriške (oko 0.1 mm) i zatim korištenje elektrolitičkog poliranja za nastavak stanjivanja metala često završava formiranjem rupe u centru uzorka gdje elektroni mogu proći kroz vrlo tanak metal. Metali koji se ne mogu polirati elektrolitički ili materijali koji nisu provodljivi ili imaju slabu provodljivost, kao što je silicijum, generalno se razrjeđuju mehanički, a zatim se obrađuju pomoću ionskog udara. Da bi se spriječilo da neprovodni uzorci akumuliraju statički elektricitet u skenirajućem elektronskom mikroskopu, njihove površine moraju biti prekrivene provodljivim slojem.
Zašto elektronski mikroskopi imaju veću rezoluciju?
Kao što ime govori, takozvani elektronski mikroskop je mikroskop koji koristi elektronske zrake kao izvor osvjetljenja. Budući da se elektronski snop može savijati pod djelovanjem vanjskog magnetskog ili električnog polja, formirajući fenomen prelamanja sličan onom vidljive svjetlosti koja prolazi kroz staklo, možemo koristiti ovaj fizički efekat za stvaranje "leće" za elektronski snop, čime razvijanje elektronskog mikroskopa. Karakteristika transmisionog elektronskog mikroskopa (TEM) je da koristimo snopove elektrona koji prolaze kroz uzorak do slike, što se razlikuje od skenirajućeg elektronskog mikroskopa (Scanning Electron Microscope, SEM). Budući da je talasna dužina elektronskih talasa mnogo manja od talasne dužine vidljive svetlosti (talasna dužina talasa elektrona od 100kV je 0,0037nm, dok je talasna dužina ljubičaste svetlosti 400nm), prema optičkim teoriju, možemo očekivati da bi moć razlučivanja elektronskih mikroskopa trebala biti mnogo bolja od one optičkih mikroskopa. Zapravo, sposobnost rezolucije modernih elektronskih mikroskopa dostigla je 0,1 nm. Izborni udžbenik fizike za srednjoškolce to detaljnije objašnjava (male informacije iza fotoelektričnog efekta)
