Razlika između dvofotonske mikroskopije i laserske konfokalne mikroskopije
Laserski konfokalni mikroskop je skup sistema za posmatranje, analizu i izlaz koji koriste laser kao izvor svjetlosti, konjugirani princip fokusiranja i uređaj na bazi tradicionalnog optičkog mikroskopa i digitalnu obradu slike posmatranog objekta pomoću kompjutera. Glavni sistemi uključuju laserske izvore svjetlosti, automatske mikroskope, module za skeniranje (uključujući konfokalne optičke kanale i rupice, ogledala za skeniranje, detektore), procesore digitalnih signala, kompjutere i uređaje za izlaz slike (displeji, štampači u boji). Korištenjem laserskog skenirajućeg konfokalnog mikroskopa moguće je obaviti tomografiju i snimanje promatranog uzorka. Stoga je moguće posmatrati i analizirati trodimenzionalnu prostornu strukturu ćelija bez oštećenja.
U isto vrijeme, laserska skenirajuća konfokalna mikroskopija je također moćan alat za dinamičko promatranje živih stanica, višestruko imunofluorescentno obilježavanje i označavanje fluorescencije jona. Precizno analizira suštinu spektra i razlikuje signale različitih oznaka sa veoma preklapajućim spektrima emisije.
Najvažnije je da za višebojno fluorescentno bojenje može u potpunosti eliminirati utjecaj fluorescentnog preslušavanja, a minimizirati gubitak fluorescentnog signala uzorka. Sve su to stvari koje obična ogledala ne mogu postići.
Odnos žižne daljine između objektiva mikroskopa i okulara
Različiti principi
1. Fluorescentni mikroskop: koristi ultraljubičasto svjetlo kao izvor svjetlosti za osvjetljavanje objekta koji se testira, uzrokujući da emituje fluorescenciju, a zatim promatra oblik i položaj objekta pod mikroskopom.
2. Laserski konfokalni mikroskop: Na osnovu fluorescentne mikroskopije, instaliran je uređaj za lasersko skeniranje koji pobuđuje fluorescentne sonde pomoću ultraljubičastog ili vidljivog svjetla.
Različite karakteristike
1. Fluorescencijski mikroskop: koristi se za proučavanje apsorpcije, transporta, distribucije i lokalizacije supstanci unutar ćelija. Neke supstance u ćelijama, kao što je hlorofil, mogu emitovati fluorescenciju nakon što su izložene ultraljubičastom zračenju; Neke supstance same po sebi možda ne emituju fluorescenciju, ali ako su obojene fluorescentnim bojama ili fluorescentnim antitelima, one takođe mogu emitovati fluorescenciju pod ultraljubičastim zračenjem.
2. Laserski konfokalni mikroskop: Korišćenje računara za obradu slike za dobijanje fluorescentnih slika unutrašnje mikrostrukture ćelija ili tkiva, i za posmatranje fizioloških signala kao što su Ca2+, pH vrednost, membranski potencijal i promene u morfologiji ćelije na subćelijskom nivou.
