Principi i strukturne karakteristike fluorescentnih mikroskopa
Fluorescencijski mikroskop koristi visoko efikasan izvor svjetlosti u tački da emituje određenu talasnu dužinu svjetlosti (kao što je ultraljubičasto svjetlo 3650 ili ljubičasto plavo svjetlo 4200) kroz sistem filtera u boji kao ekscitacijsko svjetlo, koje pobuđuje fluorescentne tvari u uzorku da emituje različite boje fluorescencije, a zatim promatra fluorescenciju kroz objektiv i promatranje oka. Na ovaj način, čak i sa slabom fluorescencijom u jakoj pozadini, lako se prepoznaje i ima visoku osjetljivost. Uglavnom se koristi za proučavanje ćelijske strukture, funkcije i hemijskog sastava. Osnovna struktura fluorescentnog mikroskopa sastoji se od običnog optičkog mikroskopa i nekih dodataka kao što su fluorescentni izvor svjetlosti, ekscitacijski filter, razdjelnik zraka u dvije boje i filter za blokiranje. Fluorescentni izvor svjetlosti - obično koristi ultra-živine lampe ultra visokog pritiska (50-200W), koje mogu emitovati svjetlost različitih talasnih dužina, ali svaka fluorescentna supstanca ima talasnu dužinu ekscitacijske svjetlosti koja proizvodi najjaču fluorescenciju. Stoga je potrebno dodati ekscitacijske filtere (obično ultraljubičaste, ljubičaste, plave i zelene ekscitacijske filtere) kako bi se omogućilo da samo određena talasna dužina ekscitacijske svjetlosti prođe i ozrači uzorak, dok apsorbira svu drugu svjetlost. Nakon što je ozračena ekscitacijskim svjetlom, svaka supstanca emituje vidljivu fluorescenciju sa talasnom dužinom dužom od talasne dužine zračenja u vrlo kratkom vremenskom periodu. Fluorescencija ima specifičnost i općenito je slabija od ekscitacijske svjetlosti. Da bi se uočila specifična fluorescencija, potrebno je dodati filter za blokiranje (ili potiskivanje) iza objektiva.
Njegove funkcije su dvostruke: prvo, da apsorbira i blokira ekscitacijsko svjetlo da uđe u okular kako bi se izbjeglo ometanje fluorescencije i oštećenje očiju; drugo, da se izabere i dozvoli specifična fluorescencija da prođe, pokazujući specifičnu fluorescentnu boju. Dvije vrste filtera moraju se koristiti u kombinaciji.
