Uloga svakog filtera u fluorescentnoj mikroskopiji
Najvažniji problem kod fluorescentne mikroskopije je kombinacija filtera, a i filter ekscitacije i filter za zaštitu moraju biti prikladni za posmatrano fluorescentno tijelo i međusobno usklađeni. Za određene specifične svrhe, ako postoji greška u odabiru filtera, to može dovesti do nesporazuma, pa čak i do netočnih rezultata. Dostignuća tehnologije fluorescentne mikroskopije i upotreba visokokvalitetnih filtera i genijalnih filterskih grupa su neodvojivi. Postoji nekoliko vrsta filtera za fluorescentnu mikroskopiju.
1. Filter koji apsorbira toplinu
Filter koji apsorbira toplinu je neophodan filter kako bi se spriječilo da termalno zračenje u spektru izvora svjetlosti ošteti grupu optičkih uređaja. Rani napredni mikroskopi bili su opremljeni bocama u obliku bubnja koje su mogle držati destilovanu vodu kao uređaje za apsorpciju toplote. Moderni istraživački mikroskopi velikih razmjera opremljeni su staklenim filterima koji apsorbiraju toplinu u svjetlosnim kutijama ili komorama izvora svjetlosti, koje su prozirne, blago žute staklene ploče. Leitz-ovi KG1 (2 mm) i BG38 (4 mm) filteri mogu prenijeti gotovo sve ultraljubičaste i vidljive spektre svjetlosti, čineći ih filterima sa svjetlosnim fluksom do 98%. On samo selektivno apsorbuje infracrvene linije fototermalnog zračenja.
2. Filter pobude
Filteri za pobuđivanje mogu selektivno apsorbirati spektralne linije duge valne dužine i samo propuštati ultraljubičasto svjetlo. Filteri za ljubičasto, plavo i zeleno svjetlo su filteri pobude. Zeiss, Reichert, Olympus B-serija, G-serija, BG serija, Shott UG serija, Opton H, G, BP serija, Leitz BP serija i drugi filteri su svi filteri pobude.
3. Filter za blokiranje
Blokirajući filter je filter koji selektivno apsorbuje spektralne linije kratke talasne dužine i infracrveno zračenje, omogućavajući posmatraču da vidi fluorescenciju koju emituje objekat koji se testira, a istovremeno štiti rožnicu od UV oštećenja.
4. Filter za odvajanje svjetla u boji
Filter za odvajanje svjetla u boji je filter koji reflektira pobudno svjetlo na objekt koji se testira, uzrokujući da objekt emituje fluorescenciju, a zatim prenosi fluorescenciju do okulara. Ovaj tip filtera se može koristiti samo u koncentratorima padajućeg zraka, dok transmisiona svjetlosna fluorescentna mikroskopija ne zahtijeva razdvajanje boja.
5. Filter za smetnje
Interferentni filter je vrsta filtera pobude visokih performansi. To je filter napravljen slaganjem nekoliko tankih metalnih filmova između dva polirana staklena lista. Indeks loma svakog tankog metalnog filma je različit, tako da se spektralne linije različitih valnih dužina izvora svjetlosti osvjetljenja više puta reflektiraju na svaki metalni film, uzrokujući da se neke valne dužine spektralnih linija poništavaju zbog destruktivne interferencije, dok su druge ojačane aditivne smetnje i prenose se kroz. Ovo rezultira filterom sa uskim spektrom transmisije, širinom pola vrha od samo 6~20nm i propustljivošću od 60%~70%.
