Posebna struktura fluorescentnog mikroskopa uključuje:
(I) Sistem filtera u boji
Filter u boji je važan dio fluorescentnog mikroskopa, njegove osnovne komponente su filter ekscitacije (prvi barijerski filter), emisioni svjetlosni filter (drugi filtar barijere) i poluprozirni i polu-antifilterski sastav (ogledalo koje cijepa snop). . Razni proizvođači modela filtera u boji, naziv često nije ujednačen.
1. Filter pobuđene svjetlosti i emisioni svjetlosni filter: prema izvoru svjetlosti i karakteristikama fluorohroma, obično se biraju sljedeće tri vrste podudaranja, kako bi se osigurao određeni raspon talasnih dužina pobuđenog svjetla i izvršio pobuđivanje fluorescencije uzorka kroz okular za snimanje.
UV ekscitacija: Filter pobuđenog svjetla omogućava prijenos UV svjetlosti i blokira prolaz vidljive svjetlosti iznad 400nm. Odgovarajući emisioni filter omogućava prolaz plave svjetlosti, koja se u vidnom polju čini plavom, npr. za DAPI bojenje.
Pobuđivanje plavog svjetla: Filter pobuđenog svjetla omogućava prolazak plave svjetlosti, blokirajući druge valne dužine svjetlosti. Odgovarajući emisioni filter omogućava prolaz zelenog svjetla, npr. za GFP markere za bojenje.
Zelena ekscitacija: Filter ekscitacije dozvoljava zelenom svjetlu da prođe, blokirajući druge valne dužine. Odgovarajući emisioni filter obično propušta crveno svjetlo, npr. bojenje rodaminom.
2. Polutransparentni i polureflektirajući filter: njegova uloga je da potpuno blokira pobuđivanje svjetlosti kroz refleksiju; i kroz odgovarajući opseg talasnih dužina emitovane svetlosti. Njegov model i pobuda svetlosnih filtera i emisija svetlosnih filtera odgovaraju.
(B) objektiv i okular
Mogu se primeniti različita sočiva objektiva, ali * dobar izbor simetričnih, ahromatskih sočiva objektiva, jer je autofluorescencija veoma mala i svojstva prenosa svetlosti (oblast talasnih dužina) pogodna za fluorescenciju. Kako je svjetlina fluorescencije slike u vidnom polju mikroskopa proporcionalna kvadratu brzine otvora objektiva i obrnuto proporcionalna njegovom povećanju, tako da bi se poboljšala svjetlina fluorescentne slike, objektiv s velikom brzinom izbočenja trebao bi biti korišteno. Posebno za fluorescenciju nije dovoljno jak uzorak, treba koristiti veliku brzinu usta, visoku propusnost objektiva, sa što je moguće nižim s okularom.
(C) ostali optički uređaji
Reflektor, njegov reflektirajući sloj je uglavnom prevučen aluminijumom, jer aluminij na ultraljubičastom i vidljivom svjetlu apsorbira plavo-ljubičastu regiju manje, reflektirajući do 90% ili više (dok je reflektivnost srebra samo 70%). Uglavnom se koriste ravni reflektori. Ogledalo za reflektore, dizajnirano i proizvedeno posebno za fluorescentnu mikroskopiju, ogledalo za reflektore od kvarcnog stakla ili drugog UV prozirnog stakla. Uređaj padajućeg svjetla, koji je pored funkcije izvora svjetlosti koji se prenosi, pogodniji za neprozirne i prozirne uzorke, kao što su debeli film, filter membrane, kolonije, kulture tkiva i drugi uzorci za direktno promatranje. Posljednjih godina razvijen je novi tip fluorescentnog mikroskopa koji koristi uređaj za padajuće svjetlo, nazvan padajući fluorescentni mikroskop.
(D) izvor svjetlosti
Danas se kao izvor svjetlosti koristi živina lampa od 50 ili 100 W visokog pritiska. Radom pražnjenja dvije elektrode, uzrokovanog isparavanjem žive, lopta zraka raste brzo (ovaj proces općenito traje oko 5 ~ 15 min), a u procesu emisije svjetlosnih kvanta, valna dužina oslobođene svjetlosti je dovoljna da se pobuđuje sve vrste fluorescentnih supstanci, stoga se za fluorescentnu mikroskopiju obično koristi.
Živine žarulje imaju relativno kratak vijek trajanja, obično 200 sati, i kao odgovor na ovo ograničenje vijeka trajanja, posljednjih godina, novi fluorescentni izvor svjetla, X-Cite, naširoko se koristi za dug vijek trajanja lampe od 2000 sati i fleksibilnu upotrebu. - nije potrebno prethodno zagrevanje i spreman je za upotrebu odmah iz kutije.
