Postoje dvije vrste fluorescentnih mikroskopa na osnovu njihovih svjetlosnih putanja.
1. Transmisioni fluorescentni mikroskop: Ekscitacijski izvor svjetlosti prolazi kroz materijal uzorka kroz kondenzator da pobuđuje fluorescenciju. Obično se koristi kolektor tamnog polja ili se može koristiti običan kolektor, a reflektor je podešen da skrene i bočno zrači pobudno svjetlo na uzorak. Ovo je stariji fluorescentni mikroskop. Prednost je što je fluorescencija jaka pri malom uvećanju, ali nedostatak je što fluorescencija slabi kako se uvećanje povećava. Stoga je bolje promatrati veće materijale uzoraka.
2. Epifluorescentni mikroskop je nova vrsta fluorescentnog mikroskopa razvijena u moderno doba. Razlika u odnosu na gore navedeno je u tome što ekscitacijsko svjetlo pada naniže sa objektiva na površinu uzorka, odnosno, isto sočivo objektiva se koristi kao kondenzator osvjetljenja i objektiv objektiva za prikupljanje fluorescencije. Na optičku putanju treba dodati dvobojni razdjelnik zraka, što je 45% s optičkim uranijumom. Ugao, ekscitacijsko svjetlo se reflektira u objektiv objektiva i koncentriše na uzorak. Fluorescencija koju generira uzorak i pobudna svjetlost reflektirana od površine sočiva objektiva i površine pokrovnog stakla ulaze u sočivo objektiva u isto vrijeme i vraćaju se u dikromatski razdjelnik snopa, tako da je pobudna svjetlost odvojena od fluorescencije, preostala pobuda svjetlo tada apsorbira filter za blokiranje. Ako koristite različite umetke za pobuđivanje/dvobojni razdjelnik zraka/filtar za blokiranje, možete zadovoljiti potrebe različitih proizvoda fluorescentne reakcije. Prednost ove vrste fluorescentnog mikroskopa je u tome što je vidno polje ravnomjerno osvijetljeno, slika je jasna, a što je veće povećanje to je fluorescencija jača.
(2) Kako koristiti fluorescentni mikroskop.
1. Uključite izvor svjetlosti i živina lampa ultra visokog pritiska treba da se zagreje nekoliko minuta da dostigne svoju najsjajniju tačku.
2. Transmisioni fluorescentni mikroskopi zahtijevaju da se između izvora svjetlosti i kondenzatora ugradi potreban filter ekscitacije i da se odgovarajući filter za blokiranje postavi iza objektiva. Epifluorescentni mikroskopi treba da umetnu potrebni filter za pobuđivanje/dvobojni razdjelnik snopa/umetak filtera za blokiranje u prorez svjetlosnog puta.
3. Koristite mikroskop sa malim uvećanjem da posmatrate i podesite centar izvora svetlosti u skladu sa uređajima za podešavanje različitih modela fluorescentnih mikroskopa tako da se nalazi u centru cele tačke osvetljenja.
4. Postavite uzorak uzorka i prilagodite fokus za posmatranje. Molimo obratite pažnju tokom upotrebe: Ne posmatrajte filter direktno očima da biste izbegli oštećenje oka; kada se uzorak promatra uljnim sočivom, morate koristiti posebnu nefluorescentnu uljnu leću; živina lampa visokog pritiska ne može se ponovo otvoriti odmah nakon što se isključi. Može se ponovo pokrenuti nakon 5 minuta, inače će biti nestabilan i utjecati na vijek trajanja živine lampe.
(3) Posmatrajte pod fluorescentnim mikroskopom na platformi za učenje koristeći filter plavo-ljubičastog svjetla. Vidi se da je odlomak o. U ćelijama obojenim 01% akridin narandžastom fluorescentnom bojom, jezgro i citoplazma su pobuđeni da proizvode dvije različite boje fluorescencije (tamnozelenu i narandžasto-crvenu).
