Tri vrste posmatranja mikroskopom
I. Svijetlo polje BF (Bright field BF)
BF Bright field je poznati način mikroskopije, koji se široko koristi u patologiji i testiranju za posmatranje obojenih rezova, a svi mikroskopi su sposobni da obavljaju ovu funkciju.
Svijetlo polje
II. Tamno polje DF (Tamno polje DF)
Tamno polje DF je zapravo osvjetljenje tamnog polja. Razlikuje se od svijetlog polja po tome što ne promatra direktno osvijetljenu svjetlost, već svjetlost koja se reflektira ili difraktira od objekta koji se ispituje. Kao rezultat, vidno polje postaje tamna pozadina, dok se ispitivani predmet pojavljuje kao svijetla slika.
Princip tamnog vidnog polja temelji se na Tyndallovom fenomenu u optici, prašina u slučaju jakog svjetla kroz direktnu svjetlost, ljudsko oko se ne može uočiti, to je zbog jakog svjetla oko uzroka. Ako je svjetlost usmjerena koso na njega, čini se da čestice povećavaju veličinu zbog refleksije svjetlosti i postaju vidljive ljudskom oku.
Poseban pribor potreban za posmatranje tamnog polja je uočavac u tamnom polju. Odlikuje se time što se ne dozvoljava da svetlosni snop prolazi kroz predmet koji se ispituje odozdo prema gore, već menja putanju svetlosti tako da je usmerena koso prema ispitivanom objektu, tako da svetleća svetlost ne ulazi direktno u objekat. sočiva objektiva, a svijetla slika se formira korištenjem reflektirane ili difraktirane svjetlosti od površine ispitivanog predmeta. Rezolucija posmatranja tamnog polja je mnogo veća od posmatranja svijetlog polja, * do 0.02-0.004
Darkfield
III. Fazni kontrast PH
U razvoju optičke mikroskopije, uspješan izum faznog kontrasta PH je važno dostignuće u modernoj mikroskopskoj tehnologiji. Kao što znamo, ljudsko oko može razlikovati samo talasnu dužinu (boju) i amplitudu (sjajnost) svetlosnih talasa, za bezbojne i svetle biološke uzorke, kada svetlost prođe, talasna dužina i amplituda se ne menjaju mnogo, i teško je za posmatranje uzorka u posmatranju svijetlog polja.
Mikroskop sa faznim kontrastom koristi razliku svjetlosnog raspona ispitivanog objekta za mikroskopsko ispitivanje, odnosno efikasno koristi fenomen interferencije svjetlosti da promijeni nerazlučivu faznu razliku ljudskog oka u razlikovnu razliku amplitude, pa čak i bezbojnu i transparentnu supstance mogu postati jasno vidljive. Ovo uvelike olakšava posmatranje živih ćelija, pa se fazno kontrastna mikroskopija široko koristi u invertnim mikroskopima.
Osnovni princip faznokontrastne mikroskopije je da se razlika u optičkom opsegu vidljive svjetlosti koja se prenosi kroz uzorak pretvara u razliku u amplitudi, čime se povećava kontrast između različitih struktura i čini ih vidljivim. Svjetlost se lomi kroz uzorak i odstupa od prvobitne putanje svjetlosti, dok se kasni za 1/4λ (talasna dužina). Ako se 1/4λ ponovo poveća ili smanji, razlika optičkog dometa postaje 1/2λ, a interferencija između dva snopa fotosinteze se pojačava nakon što se osi dva snopa ometaju, a amplituda se povećava ili smanjuje, tako poboljšanje kontrasta. U strukturi, fazni kontrastni mikroskop ima dvije posebne karakteristike koje se razlikuju od običnog optičkog mikroskopa:
1. prstenasta dijafragma (anulardiaphragm) nalazi se između izvora svjetlosti i kondenzatora, uloga je da svjetlost kroz kondenzator formira šuplji konus svjetlosti, fokusirajući se na uzorak.
2. fazna ploča (prstenasta fazna ploča) u sočivu objektiva obložena faznom pločicom od magnezijum fluorida, direktno ili difraktovano svjetlo može biti odloženo fazom 1/4λ. Postoje dvije vrste:
1.Fazna ploča: direktna svjetlost odgođena 1/4 λ, dvije grupe svjetlosnih valova koaksijalno dodavanje svjetlosnog talasa, povećanje amplitude, struktura uzorka od okolnog medija je svjetlija, formiranje svijetlog kontrasta (ili negativnog kontrasta) .
2.B fazna ploča: difraktirana svjetlost kasni za 1/4 λ, dvije grupe svjetlosnih valova nakon spajanja osi svjetlosnog vala se smanjuju, amplituda postaje manja, formiranje tamnog kontrasta (ili pozitivnog kontrasta ), struktura je tamnija od okolnog medija.
