Koju vrstu mikroskopa treba koristiti za promatranje bakterija?
Optički mikroskop je precizan instrument za uvećanje i posmatranje objekata. Različiti optički mikroskopi mogu posmatrati različite vrste uzoraka. Korisnici u mikrobiološkim istraživanjima, istraživanju biljaka, istraživanju životinja i drugim industrijama trebaju vidjeti razinu veličine bakterija, pa kada promatraju ovo. Kakav mikroskop treba koristiti pri analizi uzoraka? Ovaj članak ga detaljno analizira.
Odgovor na ovo pitanje može se raspravljati s aspekata kao što su veličina bakterijskih stanica i rezolucija ljudskog oka i mikroskopa.
1. Veličina bakterijskih ćelija je uglavnom u mikronskom nivou. Uzimajući Escherichia coli kao primjer: dužina je oko 1um, a širina je oko 0.5um.
2. Rezolucija se odnosi na minimalnu udaljenost između dvije tačke objekta koje se mogu jasno razlikovati.
Rezolucija mikroskopa se odnosi na minimalnu udaljenost između dvije točke objekta koje se mogu jasno razlikovati nakon što mikroskop poveća sliku.
Rezolucija instrumenta se odnosi na sposobnost instrumenta da pruži informacije o finoj strukturi objekta koji se mjeri. Veća rezolucija pruža detaljnije informacije. Uvećanje koje prelazi granicu pojačanja naziva se neefikasno pojačanje, a neefikasno pojačanje ne može pružiti detaljnije strukturne informacije.
3. Rezolucija ljudskog oka je 0.1mm, odnosno, pod uslovima dovoljnog svjetla i udaljenosti od 1 stope, minimalna udaljenost između dvije tačke koju općenito ljudsko oko može razlikovati je {{4 }}.1mm.
4. Ukratko: Ako želite vidjeti prisustvo bakterija, uvećanje mora biti najmanje: 0.1mm ÷ 0.5um=1000 ÷ 5 =200 puta. Međutim, pri ovom povećanju, bakterije (E. coli) koje se vide su samo mala tačka. Da biste vidjeli detaljnije informacije o strukturi, potrebno je povećati uvećanje mikroskopa.
5. Rezolucija običnih optičkih mikroskopa ograničena je talasnom dužinom vidljive svjetlosti (390~770nm) i općenito ne prelazi 1000 puta, što je ekstremno povećanje običnih optičkih mikroskopa. Uvećanje koje prelazi 1000 puta ne može pružiti detaljnije strukturne informacije i spada u opseg neefikasnog pojačanja.
6. Uvećanje elektronskog mikroskopa može doseći 800,000 puta. Njegov osnovni princip je isti kao i kod običnog optičkog mikroskopa. Generira kratkotalasne elektronske talase kroz visoki napon.
Pri povećanju od 400x (10x, 40x) jedva možete vidjeti bakterije, ali one su veličine samo glave igle, poput malih tačaka. Generalno, još uvijek povećavamo do 1000 puta (10x, 100x) radi posmatranja. U ovom trenutku, izgled bakterije se još uvijek može vidjeti prilično jasno, a flagellum se također može jasno vidjeti nakon specijalnog bojenja. Da biste povećali 1000 puta, morate koristiti uljno sočivo. Takozvano uljno sočivo je da kapne kap kedrovog ulja između sočiva objektiva i pokrivnog stakla. Indeks prelamanja kedrovog ulja je veći od zraka, tako da se može koristiti veće povećanje.
10x i 40x označavaju da se sočivo povećava 10 puta i 40 puta. Uvećanje okulara pomnoženo povećanjem sočiva objektiva daje ukupno povećanje mikroskopa. Okulari i objektivi mikroskopa koji se koriste u srednjim školama su zamjenjivi. Okulari su obično 5x i 10x. Okulari nekih mikroskopa uglavnom imaju samo 10x, što se koristi za uočavanje Escherichia coli (E.coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis i Bacillus megaterium (koji se koristi za uočavanje spora).
