Koji mikroskop treba koristiti za istraživanje bakterija
Optički mikroskop je vrlo precizan alat za gledanje i povećanje objekata. Različiti optički mikroskopi mogu ispitati različite vrste uzoraka. Korisnici moraju biti u mogućnosti vidjeti veličinu bakterija u poljima poput istraživanja mikroba, istraživanja biljaka i istraživanja na životinjama. Ovaj članak detaljno istražuje najbolji tip mikroskopa za korištenje pri sortiranju uzoraka.
Veličina klica, jasnoća ljudskog vida, rezolucija mikroskopa i drugi faktori mogu se koristiti za odgovor na ovo pitanje.
1. Bakterijske ćelije obično imaju prečnik od nekoliko mikrona. Uzmite u obzir veličinu Escherichia coli, koja je duga oko 1 um i 0.5 um široka.
2. Rezolucija je najmanja udaljenost na kojoj se dvije tačke objekta mogu jasno razlikovati jedna od druge.
Najmanja udaljenost između dvije točke objekta koja se može jasno prepoznati nakon što mikroskop zumira sliku naziva se rezolucijom mikroskopa.
Rezolucija instrumenta opisuje njegovu sposobnost da ponudi detalje o mikrostrukturi stvari koja se mjeri. Dostavljene informacije su detaljnije što je veća rezolucija. Osim maksimalnog povećanja, povećanje se naziva nevaljanim uvećanjem, a nevažeće povećanje ne može otkriti konkretnije strukturne detalje.
3. Najmanja udaljenost koju prosječno ljudsko oko može razlikovati između dvije tačke je 0.1mm, pod uslovom da ima dovoljno svjetla i da je udaljenost veća od jedne stope.
4. U zaključku, povećanje mora biti najmanje: 0.1mm 0.5um=1000 5=200 puta kako bi se otkrilo prisustvo klica. Međutim, bakterija (Escherichia coli) koja se vidi na ovom povećanju je samo mala mrlja. Uvećanje mikroskopa se mora podesiti kako bi se vidjeli finiji strukturni detalji.
5. Talasna dužina vidljive svjetlosti (390-770 nm) postavlja ograničenje na rezoluciju običnih optičkih mikroskopa, što ih često sprječava da uvećaju više od 1,000 puta. Povećanja veća od 1000 puta smatraju se nevažećim uvećanjima i ne mogu ponuditi finije strukturne informacije.
6. Elektronski mikroskop ima kapacitet povećanja od 800000- puta. Radi na istoj osnovnoj pretpostavci kao i obični optički mikroskop, a to je korištenje visokog napona za proizvodnju kratkih talasa elektrona.
Bakterije koje su veličine samo vrha igle i izgledaju kao male tačkice teško se mogu otkriti kada se povećaju 400 puta (10x, 40x). Da bismo vidjeli, obično povećavamo do 1000 puta (10x, 100x). Čak i uz dodatak specijalnih obojenih flagela, izgled bakterije je i dalje jasno vidljiv u ovom trenutku. Za uvećanje 1000 puta potrebno vam je uljno sočivo. 'Uljno sočivo' zahtijeva stavljanje kapi kedrovog ulja između pokrovnog stakla i objektiva. Budući da kedrovo ulje ima veći indeks prelamanja svjetlosti od zraka, može se koristiti veće povećanje.
Brojevi 10x i 40x predstavljaju uvećanje objektiva od 10x i 40x, respektivno. Da biste odredili ukupno povećanje mikroskopa, pomnožite povećanje okulara sa povećanjem objektiva. Mikroskopi koji se koriste u srednjim školama uključuju izmjenjive okulare i objektive; okulari su tipično 5x i 10x. Posmatrao sam Escherichia coli (E. coli), Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis i Bacillus megaterium koristeći mali mikroskop sa okularom koji je često samo 10x. (koristi se da se vide spore).
