Principi i strukturne karakteristike fluorescentne mikroskopije
Fluorescentni mikroskop je upotreba visoke svjetlosne efikasnosti točkastog izvora svjetlosti, kroz sistem filtriranja boja za emitiranje određene valne dužine svjetlosti (kao što je ultraljubičasto 3650 ili ljubičasto-plavo 4200) kao ekscitacijsko svjetlo, pobuđivanje fluorescentnog materijala unutar uzorak emituje različite boje fluorescencije, a zatim se uvećava kroz objektiv i okulare za posmatranje. Na taj način, u pozadini jakog kontrasta, čak i ako je fluorescencija vrlo slaba, lako se prepoznaje, visoka osjetljivost, uglavnom se koristi za proučavanje strukture i funkcije ćelije i hemijskog sastava. Osnovna struktura fluorescentnog mikroskopa sastoji se od običnog optičkog mikroskopa plus nekih dodataka (kao što su fluorescentni izvor svjetlosti, ekscitacijski filteri, separator zraka u dvije boje i filteri za blokiranje, itd.). Fluorescentni izvor svjetlosti - općenito korištena živina lampa ultravisokog pritiska (50-200W), koja može emitovati različite valne dužine svjetlosti, ali svaki fluorescentni materijal ima najjaču talasnu dužinu pobuđivanja fluorescencije, tako da je potrebno dodati filtere za pobuđivanje (općenito ultraljubičasti, ljubičasti, plavi i zeleni ekscitacioni filter), tako da samo određena talasna dužina ekscitacionog svetla kroz zračenje uzoraka, dok se druga svetlost apsorbuje. Zato je potrebno dodati ekscitacioni filter (obično ultraljubičasti, ljubičasti, plavi i zeleni ekscitacioni filteri), tako da se kroz uzorak apsorbuje samo određena talasna dužina ekscitacione svetlosti, dok se druga svetlost apsorbuje. Kada je svaka supstanca ozračena ekscitacionim svetlom, emituje vidljivu fluorescenciju veće talasne dužine od one ozračene svetlosti u vrlo kratkom vremenu. Fluorescencija ima specifičnost, generalno slabiju od ekscitacijske svjetlosti, da bi se mogla promatrati specifična fluorescencija, u objektivu objektiva iza potrebe za dodavanjem filtera za blokiranje (ili potiskivanje).
Njegova uloga je dvostruka:
Jedan je apsorbirati i blokirati ekscitacijsko svjetlo u okularu, kako se ne bi ometala fluorescencija i oštećenje oka.
Drugi je odabir i propuštanje specifične fluorescencije, pokazujući određenu fluorescentnu boju. Ove dvije vrste filtera moraju se odabrati i koristiti zajedno.
