Postoje dvije vrste fluorescentnih mikroskopa s obzirom na njihovu optičku putanju:
1. Transmisioni fluorescentni mikroskop: izvor ekscitacije svjetlosti je kroz kondenzatorsko ogledalo kroz materijal uzorka kako bi se stimulirala fluorescencija. Uobičajeni kolektor tamnog polja, može se koristiti i obični kolektor, podesiti reflektor tako da pobudna svjetlost propušta i premošćuje uzorak. Ovo je stariji tip fluorescentnog mikroskopa. Prednost je što je fluorescencija jaka pri malom uvećanju, a nedostatak je što fluorescencija slabi sa povećanjem povećanja. Zato je bolje promatrati veći materijal uzorka.
2. Fluorescencijski mikroskop padajućeg tipa ovo je novi tip fluorescentnog mikroskopa razvijen u novije vrijeme, a razlika je u tome što se pobuđivanje svjetlosti sa sočiva objektiva spušta na površinu uzorka, odnosno isto sočivo objektiva kao osvjetljenje koncentratora i sakupljanje sočiva fluorescentnog objektiva. Optičku putanju treba dodati dvobojnom separatoru snopa, koji je ugao od 45° sa svjetlosnim uranijumom, ekscitacijsko svjetlo se reflektira u objektiv objektiva i skuplja u uzorak, fluorescencija koju proizvodi uzorak i objektiv Površina sočiva, pokrivanje staklene površine, refleksija ekscitacijske svjetlosti u objektiv objektiva u isto vrijeme, i natrag u dvobojni separator snopa, tako da su pobudna svjetlost i fluorescencija odvojeni od preostale pobudne svjetlosti, a zatim ih apsorbiraju filtere za blokiranje. Ako promijenite različite pobuđene filtere/dvobojni separator snopa/kombinirani blok filtera za blokiranje, može zadovoljiti potrebe različitih proizvoda fluorescentne reakcije. Prednost ovog fluorescentnog mikroskopa je vidno polje ujednačenog osvjetljenja, jasna slika, što je veće uvećanje fluorescencije to je jače.
(B) metoda fluorescentnog mikroskopa.
1. Otvorite izvor svjetlosti, živinu lampu ultra-visokog pritiska da se zagrije nekoliko minuta kako biste došli do najsvjetlije tačke.
2. Transmisioni fluorescentni mikroskop je potrebno instalirati između izvora svjetlosti i koncentratora potrebnog za stimulaciju filtera, na stražnjoj strani objektiva sa odgovarajućim filterom za blokiranje. Padajući fluorescentni mikroskop treba umetnuti u prorez optičke putanje potrebnog ekscitacionog filtera/dvobojnog separatora zraka/umetaka filtera za blokiranje.
3. Posmatrajte sočivom sa malim uvećanjem i podesite centar izvora svetlosti tako da se nalazi u centru cele tačke osvetljenja prema uređaju za podešavanje različitih modela fluorescentnih mikroskopa.
4. Postavite krišku uzorka, fokusiranje se može posmatrati. Upotreba treba obratiti pažnju na: kraj ugradnje filtera ne koristite oko za izravno promatranje, kako ne bi došlo do oštećenja oka; sa uljnim ogledalom da biste posmatrali uzorak, morate koristiti posebno nefluorescentno uljno ogledalo; Živina lampa visokog pritiska ne može se ponovo otvoriti odmah nakon zatvaranja lampe, potrebno je 5 minuta pre nego što počnete ponovo, inače će biti nestabilna, što će uticati na životni vek živine lampe.
(C) posmatranje Pod fluorescentnim mikroskopom na nastavnoj pozornici sa plavo-ljubičastim svjetlosnim filterom, mogu se vidjeti ćelije obojene sa o,01% amidin narandžaste fluorescentne boje, a jezgro i citoplazma ćelija su pobuđeni da proizvode dvije različite boje fluorescencije (tamno zelena i narandžasto-crvena).
